بررسي اثرجهش زايي عصاره ي متانولي گياه پرسياوشان (Adiantum capillus – veneris) با تست ايمز( Ames test )

Evaluation of the Mutagenic Effect of Methanol Extract of Adiantum capillus-veneris Plant by Ames test

زمينه و هدف: گياه پرسياوشان((Adiantum capillus-verenis از خانواده ي سرخس و داراي تركيبات تري ترپنوييد است. از آنجاييكه تري ترپنوييد ها اثرات ضد تومور دارند و برروي DNA اثر مي گذارند، در اين تحقيق سعي شد كه اثرات جهش زايي احتمالي عصاره متانولي اين گياه بااستفاده از تست ايمز بررسي شود. روش بررسي: عصاره گيري با روش خيساندن با متانول در مدت 48 ساعت انجام شد. عصاره گياه از نظر آلودگي به آفلاتوكسينB1 و حضور اسيدآمينه هيستيدين به روش TLC مورد ارزيابي قرار گرفت. (minimum inhibitory concentration)MIC (كمترين غلظت مهار رشد ميكروبي) با روش رقت لوله اي تعيين شد.براي بررسي اثرات جهش زايي، از آزمون ايمز با استفاده از سويه ي سالمونلا تيفي موريم TA 100، استفاده شد. ژنوتيپ سويه با استفاده از فاكتورهاي عدم سنتز هيستيدين، حضور فاكتورR، موتاسيون rfa و موتاسيون uvrB تاييد شد. دراين تحقيق از 4 غلظت5.0، 1،1.5و2 ميلي گرم بر ميلي ليتر(غلظت هاي كمتر از 0.1 MIC پر سياوشان) كنترل مثبت (سديم آزيد) و كنترل منفي (متانول) در حضور و عدم حضور آنزيم هاي كبدي استفاده شد. يافته ها: در 4 غلظت مورد بررسي، تغيير معني داري در كلني برگشتي نسبت به كنترل منفي مشاهده نشد. همچنين در حضور آنزيم هاي كبدي، تغيير معني داري در تعداد كلني ها مشاهده نشد. نتيجه گيري: در تحقيق برون تني (In vitro) اخير، مي توان چنين نتيجه گيري كرد كه مصرف گياه پر سياوشان، احتمالا تغييري در ژن هاي باكتري سالمونلا تيفي موريوم سويه ي TA100 و در نهايت روي ژن هاي انسان ايجاد نمي كند و يا موجب تغييرات جهش زا و ژنتيكي نمي شود.

Background and Objective: Triterpenoids have been isolated from Adiantum capillus- veneris. These triterpenoids have antitumor effect. Their effect on DNA has been identified. Thus, the purpose of the present study was to obtain reliability of the non mutagenic effect of the methanolic Adiantum capillus-veneris extract using Amest test. Subjects and Methods: Long maceration process (for 48 hrs) was carried out in order to extract all constitutes. Thin layer chromatography (TLC) method was used to evaluate aflatoxin B1 contamination and histidine amino acid presence. Minimum inhibitory concentration (MIC) was determined with dilution method. Salmonella typhimurium strain TA100 was used for determination of mutagenicity. The genotype was confirmed by using histidine requirement, R- factor presence, rfa and uvrB mutations tests. The mutagenicity assay was performed at four extract concentrations (0.5, 1, 1.5 and 2mg/ml). Sodium azide (NaN3) and methanol were used as the mutagens (positive control) and negative control, respectively in the absence or presence of liver-metabolizing enzymes. Results: Adiantum capillus-veneris did have not significant mutagenic activity against negative control. The presence of liver-metabolizing enzymes did not exhibit a significant change on the number of colony formed. Conclusion: The results from this in vitro tests demonstrated that use of the extract from Adiantum capillus-veneris plant in traditional medicine does not carry the risk of mutagenic or genomic changes.