اثر زهر زنبور عسل بر بلوغ آزمايشگاهي فوليكول هاي پره آنترال موش نژاد NMRI

Effect of Honey Bee Venom on in vitro Maturation of Preantral Follicles in NMRI Mice

كشت فوليكول‌هاي نابالغ تخمدان، ابزار مهمي براي بررسي تكوين فوليكولي است و به‌عنوان انتخابي در ناباروري استفاده مي‌شود. زهرزنبورعسل (1HBV) متشكل از چندين تركيب فعال بيولوژيكي است كه اثرات آن در كمك به اوولاسيون فوليكول ها در رت اثبات شده است. هدف اين پژوهش بررسي اثر HBV بر بلوغ انواع فوليكول هاي نابالغ در شرايط آزمايشگاهي و هم‌چنين بررسي اثر آن بر كاهش بيان TNF-? به‌عنوان يك ژن پيش برنده تحليل فوليكولي است. فوليكول ها از تخمدان موش جدا و در محيط ?-MEM كشت داده شدند و بر اساس قطر فوليكولي به سه گروه پره آنترال كوچك، متوسط و بزرگ تقسيم گرديدند. هر سه گروه تحت تيمار 1µg/mlHBV قرار گرفتند. اثرات كشندگي HBV بر روي فوليكول ها به‌روش رنگ آميزي تريپان بلو بررسي شد. قطر فوليكولي و تغييرات مورفولوژيكي نشان‌دهنده بلوغ فوليكولي با اكولر مدرج و هم‌چنين تغييرات بيان فاكتور TNF-? به‌روش فلوسيتومتري اندازه گيري شد. نتايج: بررسي قطر فوليكولي نشان داد كهHBV موجب افزايش (P < 0.001) قطر فوليكول ها مي‌شود. ميزان تخمك‌هاي 2GV درگروه كنترل و تيمار به‌ترتيب 53? و 4/31? برآورد شد كه اين كاهش با 001/0P < معني‌دار بود. درصد پيشرفت تخمك‌ها به مراحل ميوز I در گروه كنترل و تيمار به‌ترتيب حدود30? و 2/43? و به‌مرحله ميوزII به‌ترتيب 15? و‌ 3/22? محاسبه شد. نتايج حاصل از فلوسيتومتري نشان داد كه HBV‌ مي تواند بيان TNF-? را در سلول هاي فوليكولي به‌ميزان 4? كاهش دهد. در مجموع مي‌توان اظهار داشت كه HBV سبب افزايش معني‌داري در سير بلوغ آزمايشگاهي فوليكول هاي پره انترال شده و در نتيجه موجب آمادگي بهتر براي لقاح مي‌گردد. از طرفي نشان داده شد كه HBV تا حدودي مي تواند بيان فاكتور التهابي و نكروزه كننده TNF-? را كاهش دهد.

The in-vitro culture of immature ovarian follicles is used to examine the factors that regulate follicle development and may ultimately provide options for reproductive infertility. Normal follicular development of an oocyte that is capable of fertilization and embryonic development depends upon a complex sequence of cellular interactions within the follicle . Honey Bee Venom (HBV) contains some biological active components which has been demonstrated it,s promoting effect on ovulation up to 70 % in rats . The aim of this research is study of the effect of HBV on in-vitro maturation of different type of preantral follicles. In this research, unmature follicles were taken from 14 day-old mice and cultured in ?-minimal essential medium (?-MEM) and divided to small, medium and large preantral follicles and treated with 1µg/ml BV. Then diameter of follicle was measured until 4th days. Finally, morphological appearance of mature oocytes was studied. Studies of follicle diameters and flowcytometry showed HBV led to an increase in follicle diameters (p < 0.001). Amount of GV was 53 %(control group) and 31.4 (treatment group)that was significative (p < 0.001). Developing up to meiosis I was 30% (control group) and 43.2% (treatment group) and developing up to meiosis II was 15% (control) and 22.3% (treatment group). In brief, we are confirmed that honey bee venom has led to significant changes in in-vitro maturation of preantral follicles and consequently, better performance for fertilization.