تاثير يونومايسين به عنوان يك ماده مصنوعي فعال كننده تخمك بر نتايج لقاح پس از انجام تزريق سيتوپلاسمي اسپرم به درون تخمك

Effect of Ionomycin as an Artificial Oocyte Activator on Fertilization Outcome by ICSI

مقدمه: جهت افزايش احتمال لقاح در مواردي كه عدم موفقيت لقاح بعد از انجام تزريق سيتوپلاسمي اسپرم به درون تخمك (ICSI)، ناشي از فعال نشدن تخمك باشد، فعال كردن تخمك به صورت مصنوعي توصيه مي شود. روش هاي فعال كردن مصنوعي تخمك از طريق استفاده از يك ماده شيميايي يا به طريق الكتريكي مي باشد. مطالعه حاضر با هدف بررسي تاثير يونومايسين به عنوان يك ماده شيميايي كه به طور مصنوعي باعث فعال سازي تخمك مي شود، بر ميزان لقاح، تسهيم، رشد و نمو جنين و ميزان بارداري بعد از انجام ICSI انجام شد. روش كار: اين مطالعه مداخله اي در سال 84-1383 بر روي 87 زوج نابارور مراجعه كننده به مركز باروري و ناباروري اصفهان كه علت ناباروري آنها فاكتورهاي مردانه بود، انجام شد. مايع سمن از افراد مورد مطالعه جهت درمان ICSI جمع آوري شد. بخشي از آن جهت آناليز معمول سمن كه شامل بررسي غلظت، تحرك و مورفولوژي است، بر اساس معيارهاي سازمان بهداشت جهاني استفاده شد و باقيمانده نمونه ها به روش با Pure Sperm شستشو داده شد و جهت انجام عمل ICSI مورد استفاده قرار گرفت. براي هر بيمار، اووسيت ها به طور تصادفي در دو گروه كنترل و تيمار قرار گرفتند. اووسيت هاي گروه تيمار به مدت 10 دقيقه در مجاورت با 10 ميكرو مولار يونومايسين قرار گرفتند. پس از گذشت 18- 16 ساعت از تزريق به داخل اووسيت، ميزان لقاح بر اساس مشاهده پيش هسته ها بررسي شد. ميزان تسهيم و كيفيت جنين 48 و 72 ساعت پس از لقاح براي هر دو گروه بررسي و ثبت شد. داده ها پس از گردآوري با استفاده از نرم افزار آماريSPSS (نسخه 5/11) مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. جهت مقايسه ميانگين داده ها بين دو گروه از آزمون تي استفاده شد. ميزان pكمتر از 05/0 معني دار در نظر گرفته شد. يافته ها: بين دو گروه از نظر ميزان لقاح و درصد تسهيم 72 ساعت بعد از ICSI تفاوت معني داري مشاهده شد (001/0 > p). به علاوه در بيماراني كه گروه كنترل آنها فاقد لقاح بود، از گروه تيمار با يونومايسين، 2 عدد بارداري به دست آمد. در حالي كه در گروهي كه ميزان لقاح پايين (33-1%) بود، ميانگين ميزان لقاح در گروه تيمار آنها (31/58%) نسبت به گروه كنترل (3/14%) به طور معني داري افزايش يافت. نتيجه گيري: فعال سازي مصنوعي تخمك با استفاده از يونومايسين نه تنها بر ميزان موفقيت در لقاح، بلكه بر ميزان تسهيم و همچنين رشد جنين اثر مثبت دارد.

Introduction: To increase the likelihood of fertilization in cases of failed oocytes activation after Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) due to oocyte lack of activation, artificially activating oocyte is recommended. Artificial oocyte activation methods include: electrical and chemical activation. The aim of this study was to evaluate the efficiency of Ionomycin as a chemical substance that artificially activates oocyte on fertilization, cleavage rate and embryonic development, and pregnancy rates after ICSI was performed. Methods: This interventional study was held on 87 couples with male factor etiology referring to Fertility and Infertility center for treatment in 2004-2005. Semen sample was collected from participants for ICSI treatment. Routine semen analysis including examination of the concentration, motility and morphology, according to World Health Organization criteria, was carried out on part of it. The remaining samples were washed with Pure Sperm method and used to perform ICSI. After oocyte collection, the oocytes were randomly divided into two groups: control and artificial oocyte activation (AOA). The AOA group was chemically activated by exposure to 10?M Ionomycin for 10 minutes. Around 16-18 hours after ICSI, fertilization was assessed by presence of pronuclei. The rate of cleavage and quality of embryo were evaluated and recorded 48 and 72 hours after ICSI .Collected data were analyzed by using statistical software SPSS version 11.5. In order to compare the mean of data between two groups T-test was held. P value less than 0.05 was considered statistically significant. Results: Two group (AOA and control) had significant differences between mean of fertilization and cleavage rates (P < 0.001) 72 hours after ICSI. Also in patients who had no fertilization in their control group of AOA group two pregnancies were recorded. In the group whose participants had poor fertilization rate (1-3%), the mean fertilization rate in the treatment group (58.31%) was significantly increased than the control group (14.3%). Conclusion: Artificial the oocyte activation using Ionomycin not only improves fertilization but also has positive effect on cleavage rates and embryo quality which in turn affect the implantation and pregnancy rate.