معرفي ژن سيتوكروم b به‌عنوان ژن مناسب جهت تشخيص هويت خاويار و ماهيان خاوياري درياي خزر

Introdution of Cyt b Gene as usfuel gene for identification of caspian Sturgeon Caviar

هدف از اين پژوهش معرفي يك تكنيك ساده مولكولي براي شناسايي انوع خاويار در گونه‌هاي موجود در درياي خزر بود. به همين منظور نمونه‌هاي خاويار از هر يك از گونه‌هاي تاس‌ماهي روسي (Acipenser gueldenstaedtii)، قره‌برون (A.percicus)، شيپ (A.nudiventris)، ازون‌برون (A.stellatus) و فيل‌ماهي (Huso huso) به‌صورت جداگانه از صيدگاه‌هاي تركمن، خواجه نفس، چالاشت و مركز تكثير و پرورش شهيد رجايي ماهيان خاوياري استان گلستان تهيه گرديد. DNA استخراج شده از نمونه‌ها با استفاده از سه عدد پرايمر (R1، F1a و F2a)، طراحي شده بر اساس ژن سيتوكروم b، طي واكنش زنجيره‌اي پلي‌مرازي (PCR) تكثير شدند. پرايمرهاي R1و F1a به‌عنوان پرايمر اختصاصي براي تمامي گونه‌هاي ماهيان خاوياري معرفي شدند. هم‌چنين در اين پژوهش پرايمرهاي R1 و F2a به‌عنوان يك پرايمر اختصاصي براي گونه ازون‌برون معرفي شدند. علاوه بر آن، نتايج توالي‌يابي به‌دست آمده از قطعه مورد مطالعه ژن cytb نيز به‌خوبي نشان داد كه ناحيه مورد هدف و پرايمرهاي مورد استفاده در اين پژوهش مي‌تواند براي تفكيك سه گونه فيل‌ماهي، شيپ و ازون‌برون به‌كار رود. مطالعه‌هاي فيلوژنيك و تعيين ميزان همولوژي در بين توالي‌هاي به‌دست آمده مشخص نمود كه دو گونه تاس‌ماهي ايراني و روسي در ناحيه مورد مطالعه به‌طور كامل با هم مشابه مي‌باشند. نتايج اين پژوهش مي‌تواند در شناسايي خاويار در موارد دادگاهي (قاچاق)، صادرات و واردات مورد استفاده قرار گيرد. واژه‌هاي كليدي: ژن سيتوكروم b، خاويار، PCR، پرايمر، ماهيان خاوياري

The objective of this study was to introduce a simple method for identification of caviar species in caspian sea sturgeons. For this purpose, caviar samples of Acipenser gueldenstaedtii, A. percicus, A. stellatus, A. ndiventeri and Huso huso were collected from fishery stations, Khajenaphas, Torkaman and Chalasht in Golestan province and propagation center of sturgeons in Aghalla city. The extracted DNA from caviars were amplified using three primers termed R1, F2a and F1a, which were designed for cytb gene in the mtDNA. The primers of R1 and F1a were universlly introduced for all corresponding species in this study whereas R1 and F2a were spesific for A. stellatus. In addition, the results of sequencing obtained in cytb gene showed that the region studied here can be successfully utilized for identification of A. stellatus, A. ndiventeri and Huso huso species. phylogenetical study and the sequential corrolation among species studied verified the results obtained in this investigation. The results of this study can be perfectly used for identification of caviar in forensic,import and export issues. Keyword: Primer; Sturgeon; PCR; Caviar; Cytocromb Gene