اثر عصاره آبي- الكلي بنفشه و فراكسيون هاي آن بر تكثير سلول هاي سرطان گردن رحم

Effect of Hydro-Alcoholic Extracts of Viola Tricolor and its Fractions on Proliferation of Cervix Carcinoma Cells

مقدمه: مطالعات اخير نشان داده اند كه گياه بنفشه حاوي تعدادي تركيبات سيكلوتيدي است كه اين تركيبات اثرات كشندگي سلولي قوي ايجاد مي كنند. مطالعه حاضر با هدف بررسي اثر عصاره آبي- الكلي بنفشه و فراكسيون هاي آن بر تكثير سلول هاي سرطان گردن رحم انجام شد. روش كار: با استفاده از دستگاه سوكسله و اتانول 70%، از قسمت هاي هوايي بنفشه سه رنگ، عصاره آبي- الكلي تهيه و از اين عصاره، سه فراكسيون آبي، اتيل استاتي و ان- بوتانولي استخراج شد. سلول هاي مذكور در پليت كشت 96 خانه، كشت داده شدند و به مدت 24 ساعت در مجاورت غلظت هاي مختلف (0، 100، 200، 400 و 800 ميكروگرم در ميلي ليتر) عصاره يا فراكسيون ها قرار گرفتند. سپس ميزان تكثير سلول ها بر اساس روش احيا MTT مورد ارزيابي قرار گرفت. داده ها پس از گردآوري با استفاده از آزمون واريانس يك طرفه مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. از آزمون توكي براي مقايسه هاي چند گانه استفاده شد. نتايج به صورت انحراف معيار ± ميانگين بيان شد و ميزان p كمتر از 05/0 معني دار در نظر گرفته شد. يافته ها: عصاره آبي- الكلي و فراكسيون ان- بوتانولي آن (در غلظت 800 ميكروگرم در ميلي ليتر) به ترتيب باعث كاهش درصد سلول هاي زنده از 5 ± 100 درصد به 5 ± 69 (01/0 > p) و 7 ± 51 (01/0 > p) درصد شد. همچنين، غلظت هاي 400 و 800 ميكروگرم در ميلي ليتر از فراكسيون اتيل استاتي، درصد سلول هاي زنده را به ترتيب به 3 ± 75 (05/0 > p) و 3 ± 40 (001/0 > p) درصد كاهش داد. هيچ يك از غلظت هاي فراكسيون آبي قادر به تغيير درصد سلول هاي زنده نبود. نتيجه گيري: عصاره آبي- الكلي بنفشه اثر مهاري قوي بر تكثير سلول هاي سرطان گردن رحم دارد. ماده يا مواد موثره مسيول اين اثر، بيشتر در فراكسيون اتيل استاتي اين گياه قرار دارند.

Introduction: Recent studies have shown that Viola tricolor contains some cyclotide compounds which have potent cytotoxic effects. The present study was designed to investigate the effect of hydro-alcoholic extract of Viola tricolor and its fractions on proliferation of cervix carcinoma cells. Methods: Using a soxhalet apparatus, the hydro-alcoholic extract was obtained which was further fractionated into aqueous fraction, ethyl acetate and n-butanol. The cells were cultivated in 96-well plate and incubated for 24 hours with different concentrations (0, 100, 200, 400 and 800 µg/ml) of the extract or its fractions. The cell-proliferation rate was determined by MTT colorimetric assay. Data was collected and analyzed by using one-way ANOVA. For multiple comparisons, Tukey test was used. Results were expressed as mean±SD. P value less than 0.05 was considered statistically significant. Results: The hydro-alcoholic extract and n-butanol fraction, at 800 µg/ml, significantly reduced (31 and 49%, respectively) proliferation of Hela cells. Similarly, concentrations of 400 and 800 µg/ml of ethyl acetate fraction significantly decreased (25 and 60%, respectively) the surviving cells. None of the concentrations of aqueous fraction could change the percentage of live cells. Conclusion: Hydro-alcoholic extract of V. tricolor exhibits potent inhibitory effect on proliferation of cervix carcinoma cells. The main component(s) containing this effect is most likely found in ethyl acetate fraction of this plant.