اثر زمان هيدروليز ضايعات پس از پخت ماهي تن هوور (Skipjack tuna) با آنزيم آلكالاز بر راندمان بازيافت و اندازه مولكولي پروتيين‌هاي هيدروليز شده

The effect of hydrolyzing time on cooked Tuna fish (Skipjack tuna) wastes by alcalase on protein recovery and the hydrolysate molecular weight

هيدروليز آنزيمي ضايعات كارخانجات فراوري ماهي روش مناسبي براي ايجاد ارزش افزوده در آن‌ها مي‌باشد. در اين پژوهش براي هيدروليز آنزيمي ضايعات پس از پخت ماهي تن هوور (Skipjack tuna) از آنزيم آلكالاز با فعاليت آنزيمي Au/Kg 35 در دماي c?55، 5/8=pH، و زمان‌هاي 10، 20 و 30 دقيقه هر يك در سه مرحله متوالي در غالب طرح آماري كاملاً تصادفي در سه تكرار استفاده گرديد. بعد از هيدروليز، غير فعال سازي آنزيم در دماي c?90 انجام شد، سپس پروتيين‌هاي محلول به كمك سانتريفوژ با دورg×3000 در مايع رويي جدا شده و به كمك فريزدراير (خشك كن انجمادي) خشك شدند. درجه هيدروليز، راندمان استحصال پروتيين، طول زنجيره پپتيدي و وزن مولكولي پروتيين هيدروليز شده ارزيابي گرديد. نتايج نشان دادند كه در مرحله اول هيدروليز، در زمان 30دقيقه بيشترين درجه هيدروليز(12/8%) و بالاترين درصد بازيافت پروتيين (71/27%) بدست آمد(05/0p < ). طول زنجيره پپتيدي در زمان 10 دقيقه سوم از بيشترين ميزان، معادل 23/48% برخوردار بود. كوتاه‌ترين طول زنجيره پپتيدي در زمان‌هاي طولاني هيدروليز مشاهده گرديد. وزن مولكولي پروتيين‌هاي هيدروليز شده بر اساس الگوي الكتروفورز با ژل جداكننده 15% تا 5/12 كيلو دالتون برآورد شد.

The best approach to create value added materials from fish processing wastes is protein hydrolyzing by enzymes. In the current research, hydrolysis was carried out using Alcalase at 55?C, PH= 8.5 with 35 Au/kg protein enzyme activity in three times, 10, 20 and 30 min.(s) , each with three stages using a completely randomized design and three replications. After hydrolysis process enzyme inactivation happened at 90?C for 15min. Soluble proteins separated from the insoluble by 5min. centrifuge at 3000×g. The freeze dried supernatant was used for degree of hydrolysis, protein recovery, peptide chain length and molecular weight determinations. The results showed that in the first stage of hydrolysis for 30min(s). Sample, the highest degree of hydrolysis (8.12%) and the highest protein recovery (27.71 %) was obtained (p < 0.05). In the third stage of 10 min. sample, the length of peptide chain reached to its maximum value (48.23%). Molecular weights of the hydrolysates in all samples were under 12.5 KDA.