تاثير دو گونه دافنه، بتولين و بتولينيك اسيد بر فعاليت آلكالين فسفاتاز در دو رده سلول سرطانيK562 وMCF-7

The Effects of Two Species of Daphne, Betulin and Betulinic Acid on Alkaline Phosphatase Activity in Two Human Cancer Cell lines, K562 and MCF-7

زمينه و هدف: تغيير فعاليت آلكالين فسفاتاز، يكي از علايم مهم در بسياري از بيماري ها مي باشد. هدف اين مطالعه بررسي تاثير دو گونه دافنه، بتولين و بتولينيك اسيد بر فعاليت آلكالين فسفاتاز در دو رده سلول K562 و MCF-7 بود. روش بررسي: در اين مطالعه تجربي، تعداد 106 سلول از دو رده سلول سرطاني K562 وMCF-7 در ظروف كشت سلولي در دماي 37 درجه سانتي‌گراد و 5 درصد دي اكسيد كربن با دوزهاي نزديك به IC50 مواد گياهي تيمار شد. ميزان بقاي سلول ها، فعاليت آنزيم آلكالين فسفاتاز داخل و خارج سلولي و ميزان پروتيين كل در هر تيمار بررسي گرديد. داده‌ها با آزمون هاي آماري آناليز واريانس چند متغيره اي تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: فعاليت آلكالين فسفاتاز داخل سلولي رفتار متفاوتي نسبت به فعاليت آلكالين فسفاتاز خارج سلولي نشان داد(01/0 > p). بيشترين افزايش درصد فعاليت آلكالين فسفاتاز داخل سلولي در دو ردهK562 وMCF-7 مربوط به تيمار با دافنه ماكروناتا به ترتيب 339 و 236 درصد بود. در حالي كه، كمترين كاهش فعاليت آلكالين فسفاتاز خارج سلولي مربوط به اثر بتولين در دو رده سلولي K562 وMCF-7 به ترتيب 4/3 و 6/5 درصد نسبت به گروه كنترل مشاهده شد. نتيجه‌گيري: افزايش غيره منتظره فعاليت آلكالين فسفاتاز داخل سلولي تحت اثر دوگونه دافنه، ماده خالص بتولين و بتولينيك اسيد مي تواند ناشي از تغيير در تركيب اجزاي غشاي پلاسمايي و افزايش پروتيين هاي متصل نشده به غشا يا ايجاد شكل فعال تر آلكالين فسفاتاز درون سلولي باشد.

Background & aim: Changes of alkaline phosphatase activity is one of the symptoms of many diseases. The aim of this study was to evaluate the effect of two types of Daphne, Betulin and Betulinic acid, on alkaline phosphatase activity in K562 and MCF-7 cell lines, respectively. Methods: In this study, 106 cancer cell lines of K562 and MCF-7 were cultured in presence of 5% carbon dioxide at 37 ° C. at doses near the IC50. The viability of cells, inside and outside alkaline phosphatase activity and the amount of total protein in each treatment were studied. The collected data was analyzed with a multivariate analysis of variance (Nested Design) and Dunnett test. Results: The intracellular alkaline phosphatase activity of the cells showed different behavior compared to the extracellular alkaline phosphatase activity (p < 0.01). The highest increase of alkaline phosphatase activity in two cell lines (K562 and MCF-7) were 339% and 236% which was related to the treatment by macronata daphne. Conclusion: Unexpected increase in intracellular alkaline phosphatase activity in D. mucronata, D. oleides, Betulin, and Betulinic acid treatment may be due to changes in the composition of plasma membrane component and an increase the non-connected membrane of the protein which is due to the creation of more active proteins. Keywords: Daphne mucronata, Daphne oleoides, Alkaline Phosphatase, Betulinic Acid, Betulin