بررسي شيوع استافيلوكوك آريوس مقاوم به متي‌سيلين با روش‌هاي انتشار از ديسك و مولكولي در بخش‌هاي مراقبت‌هاي ويژه و اورژانس در يكي از بيمارستان‌هاي آموزشي تهران

PREVALENCE OF METHICILLIN-RESISTANT STAPHYLOCOCCUS AUREUS BY DISK DIFFUSION AND MOLECULAR METHODS IN ICU AND EMERGENCY SECTIONS IN ONE OF EDUCATIONAL HOSPITAL, TEHRAN

پيش زمينه و هدف: استافيلوكوك آريوس مقاوم به متي سيلين يك پاتوژن عمده و مهم در ايجاد عفونت‌هاي جدي در ايران و ساير كشورها است . به دليل شيوع مقاومت به اغلب آنتي‌بيوتيك‌هاي رايج، درمان و مبارزه عليه آن بسيار مشكل شده است بنابراين هدف اين مطالعه تعيين فراواني ژن مقاومت به متي‌سيلين در ايزوله‌هاي استافيلوكوكوس آريوس به روش PCR و بررسي الگوي حساسيت آنتي‌بيوتيكي نسبت اگزاسيلين و ديگر آنتي‌بيوتيك‌ها به روش انتشار از ديسك مي‌باشد. مواد و روش‌ها: اين مطالعه در طي سال 1390 بر روي 73 نمونه از استافيلوكوكوس آريوس جداسازي شده از دو بخش مراقبت‌هاي ويژه و اورژانس صورت گرفت. در اين تحقيق تشخيص فنوتيپي به روش انتشار از ديسك انجام شد، و به منظور تشخيص ژنوتيپي يك جفت آغازگر اختصاصي جهت تشخيص ژن mecA توسط نرم‌افزار AlleleID (version 6) طراحي و توسط شركت سيناژن سنتز شد. سپس تشخيص اين ژن با آغازگرهاي طراحي شده بهينه‌سازي شد، و شيوع آن از نمونه جدا شده از دو بخش مراقبت‌هاي ويژه و اورژانس، به روش PCR مورد تاييد قرار گرفت. يافته‌ها: يافته‌هاي اين بررسي به روش PCR نشان داد كه از 73 ايزوله بدست آمده از نمونه‌هاي باليني، 89 درصد سويه‌ها ( 65مورد) ژن مقاومت به متي سيلين را دارند . ولي در بررسي الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي به روش انتشار از ديسك، فقط 74 درصد سويه‌ها (54 مورد) مقاومت به اگزاسيلين را نشان دادند. بحث و نتيجه‌گيري: نتايج اين پژوهش به روش PCR نشان مي‌دهد كه از 73 نمونه باليني، 89 درصد ايزوله‌ها ژن مقاومت به متي‌سيلين را نشان مي‌دهند. و در بررسي الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي به روش ديسك ديفيوژن آگار، فقط 74 درصد مقاومت را نشان داده‌اند. به عنوان نتيجه‌گيري، مقاومت به متي‌سيلين در استافيلوكوكوس آريوس به 89 درصد رسيده است و ميزان مقاومت چند آنتي‌بيوتيكي به بيش از 95 درصد رسيده است .

Background: Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MSRA) is one of the main causes of serious infections in Iran and other countries. Treatment of these infections has become more difficult because of resistance to most antibiotics. The aim of this study was to determine the incidence of methicillin-resistance gene in S. aureus isolates and antibiotic susceptibility to oxacillin and other antibiotics were performed by Disc Diffusion Agar (DDA). Materials and Methods: This study was carried out on SA isolates (n=73) collected from the clinical samples at during 2011 in ICU and Emeregency sections. All S. aureus isolates was identified after performing by routine laboratory procedures including, Gram stain, catalase test, DNase production, coagulase activity and mannitol salt fermentation. In this study used to identify Phenotypic by Disc Diffusion Agar (DDA) and for identify genotypic two pairs of primers designed by AlleleID software (version 6) on the basis of published DNA sequences of the S. aureus gene. Synthesis of primers was carry out by Cinnagen Company, Iran. PCR reaction of mecA with designed primers was optimized and incident of mecA was studied in clinical samples in ICU and Emergency sections. Results: The PCR analysis of 73 S. aureus isolates originated from patients for mecA showed 65 (89%) cases were positive. But only 54 (74%) isolates were methicillin resistant when we used the DDA method. Conclusion: As a conclusion, the resistance to methicillin of S. aureus in Baqiyatallah hospitals has reached to 89% and more than 95% of them were multidrug resistance. Key words: Staphylococcus aureus, antibiotic resistant, Methicillin, MRSA.