تهيه كريستال لوسيفراز جهش يافته گونه Lampyris turkestanicus و بررسي اوليه‌ پراشهاي حاصل از آن

Crystallization and preliminary diffraction studies of mutated firefly luciferase from Lampyris turkestanicus

لوسيفرازها آنزيمهايي هستند كه از سوبسترايي به نام لوسيفرين همراه با ATP وMg2+ و اكسيژن مولكولي براي انتشار نورهايي با رنگهاي متنوع استفاده مي‌نمايند. بسته به فاكتورهاي متفاوت - كه يكي از مهم ترين آنها اسيدآمينه‌هاي تشكيل دهنده لوسيفراز است- نورهايي با طيف رنگي متفاوت از لوسيفرازها منتشر مي‌شود. لوسيفراز حشره شب‌تاب گونه ايراني با نام علمي Lampyris turkestanicus نور سبز منتشر مي‌كند. در اين كار براي اولين بار كريستال لوسيفراز جهش يافته Lampyris turkestanicus (E354R/R356/H432Y) - كه نور قرمز ساطع مي‌كند- به منظور مطالعه و تعيين ساختار سه بعدي و در نهايت مطالعه مكانيسم تغيير رنگ در مقايسه با لوسيفرازهاي تعيين ساختار شده ديگر با روش كريستالوگرافي اشعه X تهيه شد. تهيه كريستال با استفاده از روش كريستالوگرافي قطره نشسته انجام شد و كريستال تتراگونالي با حد تفكيك 2/2 آنگستروم به‌دست آمد. تك واحدهاي كريستال داراي ابعاد a=85.01 b=85.01 c=97.09 است.

Luciferase enzymes efficiently convert luciferin to oxyluciferin in the presence of ATP, Mg2+ and molecular oxygen. Luciferase reaction produces a spectrum with different color under various conditions. One of the most important factors is residues of structure. Lampyris turkestanicus, Iranian firefly, luciferase emits green light. In order to study, 3D-structure determination and red-shift mechanism analysis in comparison to other determined structure luciferase, Mutated (E354R/R356/H432Y) (emits red light) luciferase from Lampyris turkestanicus has been crystallized. The crystals with 2.2? resolution of mutated firefly luciferase were obtained by the sitting drop method. The diffraction pattern from E354R/356R/H432Y luciferase belongs tetragonal system with space group P41 and unit cell dimensions a=b=85.01 and c=97.09.