جداسازي آنزيم ليپاز از باكتري Pseudomonas aeruginosa HR59 حاصل از عفونتهاي سوختگي و بهينه سازي محيط كشت آن با استفاده از روش Box-Behnken

Isolation of Pseudomonas aeruginosa HR59 lipase from burn infection and optimization of medium by use of Box-Behnken Design (BBD)

با توجه به كاربرد فراوان آنزيمهاي ليپوليتيك بخصوص ليپاز باكتريايي در صنايع غذايي، دارويي و بهداشتي از يك طرف و قيمت بالاي آن از طرف ديگر، جهت رفع مشكل توليد آنزيم ليپاز باكتريايي، توليد اين آنزيم از يك منبع در دسترس و ارزان قيمت مورد بررسي قرار گرفته است. براي اين منظور سوش جديد Pseudomonas aeruginosa HR59 از عفونت سوختگي جداسازي و شرايط كشت آن با استفاده ار روش سطح پاسخ براي چهار فاكتور غلظت كلسيم، غلظت تويين-80، غلظت روغن زيتون و زمان انكوباسيون بهينه سازي شده است. نتايج حاصل از اين روش آماري نشان داده است كه زمان انكوباسيون بيشترين تاثير و غلظت روغن زيتون كمترين تاثير مثبت را بر ترشح آنزيم دارند. در نتيجه اعمال شرايط بهينه شده در محيط كشت باكتري (3 ميلي مولار كلسيم، V/V 1.5 روغن زيتون، V/V 0.4 تويين-80 و 72 ساعت آنكوباسيون)، ترشح آنزيم به حداكثر مقدار خود مي رسد.

By attention to this fact that bacterial lipase has important role in different industries, in present investigation potential of Pseudomonas aeruginosa from burn infection for lipase secretion was studied. Optimization procedure using response surface methodology (RSM) based on Box-Behnken Design (BBD) with four factors (Ca2+ ion, olive oil and tween-80 concentration and incubation time) was used in order to investigate the effect of these parameters on the production of lipase from newly isolated bacterium; Pseudomonas aeruginosa HR59. According to the results of RSM, concentrations of Ca+2, tween-80 and incubation time were very important role on enzyme production. As a result of this optimization, maximum lipase activity was achievable at Ca+2 (3 mM), olive oil (1.5 % V/V), tween-80 (0.4 %V/V) and incubation time (72 h).