اثر آنتي اكسيداني ملاتونين بر فراسنجه هاي اسپرم گاوميش پس از فرآيند انجماد- يخ گشايي

Antioxidant effect of Melatonin on the buffalo sperm parameters after freeze thawing process

اين تحقيق با هدف بررسي اثر آنتي اكسيداني غلظت هاي مختلف ملاتونين بر فراسنجه هاي اسپرم گاوميش پس از فرآيند انجماد- يخ گشايي انجام شد. نمونه هاي مني گاوميش پس از جمع آوري، با دو نوع رقيق كننده تريس- سيترات– زرده تخم مرغ و بايوكسل به همراه غلظت هاي مختلف ملاتونين (0، 1، 50 و 100ميكرو مول) رقيق و تا C° 5 سرد و سپس در معرض بخار ازت منجمد قرار گرفته و در نهايت در تانك ازت مايع ذخيره شدند. يخ گشايي با استفاده از حمام آب گرم C°37 و در طي 45 ثانيه انجام گرفت. فراسنجه هاي تحرك اسپرم، قابليت زنده ماني ، يكپارچگي غشاي پلاسمايي و آكروزم به ترتيب توسط ميكروسكوپ فاز مقايسه اي، رنگ آميزي سوپراويتال، تست التهابي هيپواسموتيك و واكنش آكروزمي پلاسما در زمان هاي صفر و 6 ساعت پس از يخ گشايي مورد ارزيابي قرار گرفت. بر اساس نتايج به دست آمده هر دو نوع رقيق كننده حاوي سطوح مختلف ملاتونين نسبت به گروه شاهد به طورمعني داري (05/0 > P) باعث بهبود توانايي انجماد اسپرم شدند. غلظت 100 ميكرومول در زمان صفر بعد از يخ گشايي و 6 ساعت پس از يخ-گشايي در هر دو نوع رقيق كننده بيشترين بهبود (05/0 > P) را در ويژگي هاي ارزيابي شده داشت. نتيجه گيري در يك سطر آورده شود و در چكيده انگليسي هم لحاظ شود

This study was carried out to evaluate the potential impact of melatonin on the frozen–thawed semen quality of buffalo. Ejaculated semen was extended in a Tris–citrate egg yolk and bioexcell extenders containing various concentrations of melatonin (0, 1.0, 50 and 100 ?M). After cooling at 5?C, semen samples were frozen in liquid nitrogen vapor and plunged into liquid nitrogen for storage. Straws from each treatment were thawed at 37 °C water bath for 45 s to assess the semen quality in terms of sperm motility, viability, plasma membrane integrity and acrosomal integrity at 0 and 6 h after thawing. Post-thawed sperm motility was determined using a phase-contrast microscope. Viability, plasma membrane integrity and acrosomal integrity were evaluated by the supravital staining, hypo-osmotic swelling test and normal acrosomal reaction, respectively. Adding melatonin in two extenders conferred better cryopreserving ability to spermatozoa compared to control groups. The highest (P < 0.05) value was achieved by addition of 100 ?M melatonin upon and 6 h after thawing.