تغييرات پروفيل پلاسميدي چندسويه بومي سودوموناس فلورسنس تحت تاثير مقادير مختلف عناصر روي و كادميوم

Changes in Plasmid Profile of Several Indiginous Pseudomonas Fluorescent Isolates, as Affected by Different Levels of Zn and Cd

مقاومت گونه‌هاي مختلف باكتري جنس سودوموناس در برابر آلودگي فلزات سنگين متفاوت است. از آنجا كه بين مقاومت به فلزات سنگين و پلاسميدهاي موجود در باكتري‌ها رابطه وجود دارد، در اين مطالعه پروفيل پلاسميدي جدايه‌هاي ريزوباكتري محرك رشد گياه Pseudomonas flouroscens در معرض مقادير مختلف كادميوم و روي مطالعه و بررسي شد. باكتري‌هاي مورد استفاده قبلاً از فراريش گياه سويا جدا شده بودند. جدايه‌هاي مذكور خالص‌سازي و با آزمون‌هاي بيوشيميايي و زيستي شناسايي شدند. سپس براي تعيين ميزان مقاومت اين سويه‌ها از غلظت‌هاي مختلف عناصر روي و كادميوم در محيط كشت جامد H.E.P.E.S و M.E.S استفاده شد. براساس ميزان رشد در حضور فلزات روي و كادميوم، سويه‌ها به چهار گروه دسته‌بندي شدند. سپس دو سويه از هر گروه مقاومتي به مدت دو ماه در معرض غلظت‌هاي مختلف آلاينده‌هاي روي و كادميوم قرار گرفت. پس از طي مدت گرماگذاري، سويه‌ها بازكشت شدند و از كشت‌هاي حاصل، با استفاده از روش ليز قليايي، پلاسميد استخراج و پروفيل پلاسميدي تهيه شد. بررسي‌ها نشان داد اثرات سمي كادميوم حتي در غلظت كمتر از روي شديدتر است و در تراكم بالاي كادميوم همه سويه‌ها پلاسميد از دست مي‌دهند. همچنين سه سويه داراي مقاومت چندگانه بودند.

The species of Pseudomonas genus show different levels of resistance to soilʹs heavy metals pollution. Since, there exists is a relationship between heavy metal resistance and plasmid profile of bacteria, in this study, plasmid profile of Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR) Pseudomonas fluorescence isolates were studied in the presence of cadmium and zinc. The bacteria were initially isolated from soybean rhizosphere and characterized as based on biochemical and biological properties. Then, different concentrations of Zn and Cd, in the H.E.P.E.S and M.E.S solid mediums, were employed to evaluate the resistance of the isolates to these heavy metals. Based on the growth in the presence of Zn and Cd, the isolates were classified into 4 groups. Two isolates taken from each group were exposed to different concentrations of Zn and Cd for a period of 2 months. Then, the isolates were sub-cultured and their plasmids isolated using alkaline lysis procedure. The plasmid profile of isolates indicated that the toxic effect of the cadmium was higher than that of zinc even when at lower concentrations. At concentrations of cadmium, all the isolates lost their plasmids. Three isolates also showed multiple resistances to heavy metals.