مروري بر استفاده از روش پرفيوژن كبدي در مطالعات سم شناسي

A Review of Liver Perfusion Method in Toxicology Studies

مقدمه: با استفاده از سيستم پرفيوژن كبد جدا شده يا به عبارتيPerfused Rat Liver) (IPRL: Isolated ، سلول‌ها به طور مستقيم در مجاورت غلظت‌هاي مختلفي از تركيبات شيميايي قرار مي‌گيرند و پاسخ‌هاي بيوشيميايي مانند تغييرات آنزيمي و پاتولوژي قابل ارزيابي است. از نظر تسريع در پاسخ‌هاي ياده شده، پرفيوژن كبدي در مطالعات سم شناسي به عنوان يك روش قابل قبول محسوب مي‌شود. روش بررسي: قابليت زيست كبدي از طريق مشاهده رنگ آن (قهوه‌اي روشن)، تنظيم سرعت پرفيوژن و تنظيم دما در 37 درجه سانتي‌گراد و كنترل PH تعيين مي‌شود. بعد از بيهوشي كامل، حفره شكمي حيوان باز شده و بافر از طريق وريد باب وارد شده و در سلول‌هاي كبدي جريان مي‌يابد. مايعات خروجي از طريق وريد خروجي (Inferiorvena cava) جمع‌آوري ‌شده و پاسخ‌هاي بيوشيميايي مورد ارزيابي قرار مي‌گيرد. نتايج: تغييرات آنزيم‌هاي ترانسفراز(ALT ,AST) به عنوان معيار تغييرات بيوشيميايي به منظور ارزيابي آسيب‌هاي كبدي ناشي از داروي‌ها مانند ايزونيازيد (INH) و سموم حيواني و گياهي كاربرد وسيعي دارد. مواد تجمع‌يافته در كيسه صفرا نمونه‌هاي ارزشمند براي ارزيابي سطح گلوتاتيون GSH)) مي‌باشند. ريزبيني نمونه‌هاي پرفيوژ شده بافت از نظر شاخص‌هاي پاتولوژي مانند نكروز فيبروز، سلولاريته و ... نيز مورد تجزيه و تحليل قرار مي‌گيرند. نتيجه‌گيري: مطالعه تغييرات آنزيم‌هاي ALT ,AST و ارزيابي سطح GSH و ريزبيني نمونه در روش پرفيوژن كبدي موجب شده تا آن در مطالعات سم شناسي ارزشمند باشد.

Introduction: The isolated perfused rat liver is an accepted method in toxicology studies. The isolated perfused rat liver (IPRL) is a useful experimental system for evaluating hepatic function without the influence of other organ systems, undefined plasma constituents, and neural-hormonal effects. Methods: The untreated male rats (180-220gr body weight) were anesthetised with ether and then surgery with proper method. The abdomen was opened through a midline and one transversal incision and the bile duct was cannulated. Heparin sodium solution (0.5 ml; 500 U/ml in 0.9% NaCl) was injected via the abdominal vena cava to prevent blood clotting. The liver inferior venacava was cannulated with PE-10 tubing and secured. The portal vein was immediately cannulated with an 23gr catheter which was secured and then liver was perfused in situ by Krebs- Henseleit buffer (pH 7.4; saturated with 95% O2 and 5% CO2; 37°C) at a flow rate of 20 ml/min for 3hr. Temperature, perfusion pressure, flow rate and perfusion fluid pH were closely monitored during the perfusion. Results: Transferase enzymes (ALT, AST) alterations can be widely used as a measure of biochemical alterations in order to assess liver damage due to use of drugs such as isoniazid (INH) and animal and plant toxins. Accumulated material in gallbladder are valuable samples to assess the level of Glutathione (GSH). Sections of perfused liver tissue can also be effectively analyzed for pathological aspects such as necrosis, fibrosis, cellularity. Conclusion: The isolated perfused rat liver (IPRL) is a useful and Sutible experimental system for evaluating hepatic function. In this system, the effects of adjacent organs, on the liver is minimized