اثر ايمونومدولاتوري فراكشن R10 سير روي فعاليت حياتي و توليد سايتوكاين TNF-alpha در سلولهاي CD8+ T در شرايط آزمايشگاه

In Vitro Immunomodulatory Effect of R10 Fraction of Garlic on Viability and Production of TNF-alpha in CD8+ T Cells

مقدمه و هدف: سلولهاي T خصوصا لنفوسيتهاي CD8+ T مهمترين سلولهاي سيستم ايمني در پاسخهاي ضد توموري هستند. قبلا فراكشن R10 عصاره آبي سير بعنوان ايمونومدولاتور تحريك كننده پاسخهاي Th1 و ايمني سلولي گزارش شده است . در اين مطالعه اثر ايمونومدولاتوري فراكشن R10 سير بر فعاليت حياتي و توليد سايتوكاين TNF-? سلولهاي CD8+ T در شرايط آزمايشگاه مورد بررسي قرار گرفت. روش كار: در اين مطالعه تجربي سلولهاي CD8+ T با استفاده از آنتي باديهاي منوكلونال متصل به مگنت بيد بوسيله ستونهاي جداساز به روش مگنت بيد از طحال موشهاي Balb/C جدا شدند. فراكشن R10 به روش اولترا فيلتراسيون براساس وزن مولكولي تهيه شد. آزمون كالريمتري MTT Test براي ارزيابي فعاليت حياتي سلولي استفاده شد. ميزان سايتوكاين TNF-? در سوپرناتانت كشت سلولهاي CD8+ T بوسيله روش ELIZA اندازه گيري شد. داده هاي بدست آمده با استفاده از آزمون Nonparametric Test و آزمونهاي Keraskel & Wannyʹs Test مورد مقايسه و بررسي قرار گرفتند. نتايج: يافته ها نشان مي دهند كه تمام رقتهاي فراكشن R10 ، فعاليت حياتي سلولهاي CD8+ T را در مقايسه با گروه كنترل منفي افزايش مي دهند و در حضور ميتوژن ConA ، رقت 50 :1 فراكشن R10 فعاليت حياتي سلولهاي CD8+ T را در مقايسه با ميتوژن ConA افزايش مي دهد. ترشح سايتوكاين TNF-? بطور قابل ملاحظه اي بوسيله تمام رقتهاي فراكشن R10 افزايش مي يابد. نتيجه نهايي: يافته ها پيشنهاد مي كنند كه فراكشن R10 عصاره آبي سير مي تواند بعنوان يك داروي ايمونومدولاتور براي القاي ايمني سلولي در تومور تراپي استفاده گردد.

Introduction & Objective: -cells, especially CD8+ T lymphocytes are the most important cells in anti-tumor response. Previously R10 fraction of garlic extract was reported as an immuno-modulator which induced an effective cellular immunity and Th1 responses. In this study the in vitro immunomodulatory effect of R10 on CD8+ T cells viability and production of TNF-? were evaluated. Materials & Methods: In this experimental study, using monoclonal antibodies attached to magnetic beads with isolating columns by magnetic bead method, CD8+ T cells from spleen cells of Balb/C mice were isolated. R10 fraction based on molecular weight was prepared using Ultra filtration. MTT assay was used to evaluate cell viability. TNF-? level was meas-ured in the supernatant of culture of CD8+ T cells by ELISA. Obtained data was compared and analyzed using Nonparametric Test and Keraskel & Wannyʹs Test tests.. Results: The findings indicate that all dilutions of R10 fraction increased cell viability of CD8+ T cells in comparison with the negative control group and in the presence of ConA with dilution of 1:50 of R10 fraction significantly increased cell viability of CD8+ T Cells compared to ConA alone. Secretion of TNF-? significantly increased by all dilutions of R10 fraction. Conclusion: These findings suggest that R10 fraction of garlic can be used as an Immunomo-dulator drug candidate for induction of cellular Immunity in tumor therapy. (Sci J Hamadan Univ Med Sci 2014; 20 (4):273-279)