بررسي تاثير زمانهاي مختلف ايسكمي/ريپرفيوژن بر روي سلول هاي هرمي هيپوكامپ موش صحرايي ويستار

Effect of different times of ischemia/reperfusion on pyramidal cells of hippocampus in Wistar rat

سكته مهمترين نتيجه ايسكمي مغزي است. جريان خون بازگشتي باعث برگشت اكسيژن به سلولها و آسيبهاي ناشي از ايجاد راديكالهاي آزاد مي گردد. اين امر مي تواند موجب آپوپتوز شود. سلول هاي هرمي هيپوكامپ از مناطق حساس به ايسكمي مي باشند. هرچه زمان ايسكمي طولاني تر باشد و رپرفيوژن با تاخير بيشتري آغاز شود، مراحل حفظ سلول از آسيب اكسيداتيو و آپوپتوز كارايي كمتري خواهد داشت. از آنجاييكه تعيين درصد و ميزان ضايعات و تخريب بافتي نقش مهمي در بررسي اثر حفاظتي داروهاي نوروپروتكتور دارد، تعيين ميزان ضايعات ضروري بنظر مي رسد. 30 راس رت ويستار نر در 6 گروه در فاصله هاي زماني 5،10،15،20و30 دقيقه ايسكمي مورد ارزيابي قرار گرفتند تا ميزان تخريب سلول هاي هرمي هيپوكامپ آنها مشخص شده و با گروه كنترل مقايسه شوند. مدل ايسكمي توسط بستن دو طرفه شريان هاي كاروتيد مشترك ايجاد شد. پس از 4 روز مغز موش ها بيرون آورده شده و پس از آماده سازي با دو روش هماتوكسيلين و ايوزين و نيسل رنگ آميزي گرديد. سلول هاي هرمي فشرده و با هسته هاي پيكنوتيك به وفور در ناحيه CA1 هيپوكامپ گروه هايي كه تحت ايسكمي 20 و 30 دقيقه قرار گرفته بودند، ديده شد. همچنين تعداد سلول هاي هرمي سالم بطور معني داري كاهش يافته بود بخصوص در گروه 30 دقيقه ايسكمي. به نظر مي رسد ايسكمي 20 دقيقه زمان مناسبي براي بررسي اثر دارو متعاقب ايسكمي مي باشد.

Objectives: Stroke due to cerebral ischemia is the third cause of death .Blood reperfusion and oxygen flow through tissues can cause severe damages. This process can lead to apoptosis .Pyramidal cells of hippocampus are sensitive to ischemia. Whatever the time of ischemia gets longer and reperfusion starts with delay, cell protection from oxidative damage and apoptosis will be less efficient. Since the percentage of tissue damage plays an important role in the study of neuroprotective drugs, determination of damage’s level is necessary. Materials and methods: For determining the extent of pyramidal cells of hippocampus, 30 male Wistar rat were evaluated in 5 groups (5,10,15,20 and 30 minutes of ischemia),then compared with the control group. The ischemia was induced by ligation of bilateral common carotid arteries. After 4 days, brains were removed and prepared for hematoxilin-eosin and nissl stainings. Results: compacted pyramidal cells with pyknotic nuclei were seen in CA1 region in 20 and 30 minutes of ischemia. The number of intact pyramidal cells was significantly reduced, especially in the 30 minutes of ischemia. Conclusion: It seems that 20 minutes ischemia is an appropriate time to examine the effects of drugs after ischemia.