مقايسه سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان، چربي و القايي از نظر بيان ژن‌هاي پرتواني

سابقه و هدف: با وجود پيشرفت هاي گسترده در زمينه‌ي كشت سلول هاي بنيادي، هنوز انتخاب بهترين منبع سلولي كارآمد جهت تزريق، قابل تامل است. از آنجا كه ميزان بيان ژن‌هاي پرتوان، نشان‌دهنده‌ي درجه‌ي كارآمدي سلول هاي بنيادي است، در اين تحقيق بيان برخي از ژن هاي پرتوان از جمله c-Myc، klf-4، oct4 و sox-2 در سلول هاي بنيادي به دست آمده از سه منبع بافت چربي، مغز استخوان و القايي، مورد مقايسه قرار گرفت. مواد و روش‌ها: تحقيق به روش تجربي انجام گرفت. سلول هاي بنيادي القايي مورد استفاده در اين تحقيق به صورت آماده تهيه شدند. پس از تهيه، جداسازي و كشت، سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان و چربي انساني در پاساژ سوم، ماركرهاي سطحي آنها با تكنيك فلوسيتومتري مورد ارزيابي و تاييد قرار گرفت. پس از طراحي پرايمرهاي مناسب ژن هاي c-Myc، klf-4، oct4 و sox-2 و همچنين ژن GAPDH (به عنوان ژن كنترل)، بيان ژن هاي فوق در سه منبع سلول هاي بنيادي توسط real time PCR مورد مقايسه قرار گرفت. يافته‌ها: بيان ژن c-Myc در سلول هاي بنيادي چربي بيشترين مقدار را به خود اختصاص داد و بعد از آن به ترتيب، سلول هاي بنيادي القايي و مغز استخوان قرار گرفتند. ژن klf-4 در سلول هاي بنيادي مشتق از چربي و سلول‌هاي القايي، تقريباً به يك ميزان بود و اختلاف معناداري با يكديگر نداشتند و سلول‌هاي مغز استخوان كمترين ميزان را به خود اختصاص دادند. سلول هاي مغز استخوان، بيشترين ميزان بيان oct كه مهمترين ماركر سلول‌هاي بنيادي جنيني است را از خود نشان داد. پس از آن سلول هاي القايي و سلول‌هاي چربي، بدون اختلاف معنادار نسبت به يكديگر، در رتبه‌هاي بنمودعدي قرار گرفتند. بيان ژن sox-2 در سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان، بيش از دو گروه ديگر بود. نتيجه‌گيري: سلول هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان در مقايسه با سلول هاي بنيادي القايي و سلول هاي بنيادي مشتق از چربي، منبع مناسب‌تري در كاربردهاي سلول‌درماني مي باشند.

Background and Aim: Regards to limitations to the use of embryonic stem cells, scientists created embryonic-like stem cells using reprogramming somatic cells by over expression of OCT4, klf-4, c-Myc and SOX2- genes (reprogramming markers). Considering the benefits of mesenchymal stem cells derived bone marrow and adipose tissue are mentioned today, the present study was proposed to comparison of expression of reprogramming genes of induced pluripotent stem (ips) cells and mesenchymal stem cells derived bone marrow and adipose tissue. Materials and Methods: After preparation, isolation and culture of human mesenchymal stem cells derived bone marrow and adipose tissue and iPS cells, their reprogramming genes OCT4, klf-4, c-Myc and SOX2- were assessed by real time PCR in third passage. Results: Oncogene c-Myc expression in adipose derives stem cells was the highest compare to the other group. Also Oncogene c-Myc expression in iPS cells was higher than bone marrow stem cells. Bone marrow stem cells were the lowest to klf4 expression. Expression of this gene in adipose stem cells was the same as described by iPS cells and there was no significant difference between them. Bone marrow stem cells showed the highest expression of OCT4. There was no significant difference between bone marrow and adipose stem cells. SOX-2 gene expression in bone marrow stems cells was significantly higher than the other groups. ‍Conclusion: Bone marrow stem cells in terms of OCT and c-Myc expression genes are the best source compare to adipose and iPS cells.