تعيين محيط كشت و تركيب هورموني مناسب جهت القاي كالوس و استقرار كشت تعليقي سلولي زيره سياه Bunium persicum (Boiss.) B. Fedtsch.

Optimization of suitable culture medium and hormone combinations for callus induction and cell suspension culture establishment of Bunium persicum (Boiss.) B. Fedtsch.

امروزه استفاده از قابليت‌هاي كشت سلولي براي توليد مواد موثره دارويي بسيار مورد توجه است. در اين پژوهش القا و رشد كالوس زيره سياه به‌عنوان يك گياه دارويي مهم در دو محيط كشت جامد MS و B5 كه هر يك داراي mg/l 2,4-D2 و mg/l Kin 5/0 و mg/l NAA2 و mg/l BA 5/0 بودند، مورد بررسي قرار گرفت. در آزمايش ديگر، رشد كالوس در محيط كشت MS مايع حاوي 4 تركيب هورموني متفاوت، 2,4-D ( mg/l2 و 5/0) به همراه mg/l Kin5/0 و NAA ( mg/l2 و 5/0) به همراه mg/l BA 5/0 مورد بررسي قرار گرفت. سپس استقرار كشت سلولي اين گياه و بررسي روند رشدي آن‌ در محيط كشت‌ MS مايع حاوي دو تركيب مختلف هورموني اشاره شده در قسمت القا كالوس انجام شد. بيشترين وزن خشك و درصد كالوس‌زايي در محيط كشت‌هاي جامد و بالاترين مقدار وزن تر كالوس و وزن تر و خشك سلول در محيط كشت MS مايع در تيمار حاوي mg/l NAA 2 و mg/l BA 5/0 مشاهده شد. لازم به ذكر است كه از نظر درصد كالوس‌زايي و وزن خشك در هر دو محيط كشت MS و B5 جامد حاوي اين تيمار هورموني تفاوت معني‌داري مشاهده نشد. البته منحني رشدي سلول‌ها در تيمار حاوي mg/l 2,4-D2 و mg/l Kin 5/0 پس از 3 هفته و در تيمار حاوي mg/l NAA2 و BA mg/l 5/0 پس از 4 هفته به حداكثر مقدار رسيد.

Nowadays production of secondary metabolites from plant cell suspension cultures has become an attractive subject. In this study, callus induction of black zira, an important medicinal plant, was investigated in two MS and B5 solid media, supplemented with 2 mg/l NAA + 0.5 mg/l BA, and 2 mg/l 2,4-D + 0.5 mg/l Kin. Another experiment was also carried out for callus culture in MS liquid medium with four different combinations of plant growth regulators, 2,4-D (2 and 0.5 mg/l) + 0.5 mg/l Kin, and NAA (2 and 0.5 mg/l) + 0.5 mg/l BA. For the cell suspension cultures, the hormonal combinations, as above mentioned in callus induction, were used in liquid MS medium. Results showed that the best response for the callus induction percentage and callus dry weight in solid medium as well as callus fresh weight in liquid medium was obtained from MS medium supplemented with 2 mg/l NAA + 0.5 mg/l BA. It was also found that liquid MS medium with 2 mg/l NAA + 0.5 mg/l BA was suitable for the cell suspension cultures of black zira due to the higher cell dry weight in this stage compared to other treatments. The stationary phase in growth course was observed in MS medium supplemented with 2 mg/l 2,4-D + 0.5 mg/l Kin and 2 mg/l NAA + 0.5 mg/l BA after three and four weeks, respectively.