القاي مرگ برنامه‏ريزي شده سلولي در رده سلولي توموري 5637 مثانه توسط نانوكوركومين دندروزومي با مهار ژن‏هاي دخيل در پرتواني

Dendrosomal curcumin Induced Apoptosis by Suppression of Pluripotency Genes in 5637 Bladder Cancer Cells

هدف: اگرچه خواص ضد سرطاني كوركومين، پلي فنل به دست آمده از ريشه گياه زرد چوبه، مورد تاييد بسياري از محققان است، با اين حال جذب و توزيع بافتي پايين در بدن، فعاليت كم و متابوليسم سريع از جمله معايبي است كه استفاده از كوركومين را به عنوان يك داروي ضد سرطان تا به امروز با محدوديت رو به رو كرده است. در اين مطالعه حلاليت كوركومين به واسطه نانو‏حامل‏هاي ميسلي تخريب‏پذير، خنثي و غير سمي تحت عنوان دندروزوم افزايش و نقش مهاري آن بر رشد سلول‏هاي توموري مثانه بررسي شد. مواد و روش‏ها: روش‏‏هاي MTT، فلوسيتومتري و Annexin V-FLUOS (كيت اختصاصي تشخيص مرگ سلولي) براي بررسي مرگ سلولي و مكانيسم ژنتيكي مرگ القا شده توسط نانوكوركومين دندروزومي به واسطه مطالعه ژن‏هاي دخيل در پرتواني سلول شامل OCT4A، OCT4B1، SOX-2 و Nanog با استفاده از روش Real-Time PCR انجام گرفت. نتايج: يافته‏ها بيانگر القاي مرگ سلولي به واسط نانوكوركومين دندروزومي به صورت وابسته به غلظت و زمان در رده سلولي توموري 5637 مثانه بود. بررسي چرخه سلولي بيانگر افزايش جمعيت سلولي در Pre-G1 و كاهش سلول‏ها در فاز G1 و S بود كه نشان دهنده نقش مهاري كوركومين بر همانند‏سازي سلول‏هاي رده توموري 56367 مثانه است. همچنين مشاهده بيان OCT4A، OCT4B1، SOX-2 و Nanog در تجزيه و تحليل Real-Time بيانگر نقش تومورزايي اين ژن‏ها در رشد تومورهاي مثانه است. تيمار با نانوكوركومين دندروزومي به طور معني‏داري بيان mRNA اين ژن‏ها را كاهش داد (01/0P < ). نتيجه‏گيري: به طور كلي يافته‏هاي مذكور نشان مي‏دهد كه نانوكوركومين دندروزومي با تغيير بيان ژن‏هاي دخيل در تكثير، سلول‏هاي توموري را به سمت مرگ برنامه‏ريزي شده سلولي هدايت مي‏كند كه بيانگر نقش كاربردي نانودارو در درمان سرطان مثانه است.

Objective: The anti-cancer properties of curcumin, a poliphenol extract from the rhizome of curry, has been confirmed by many investigators. However, low levels of uptake, tissue distribution and rapid metabolism has limited its application as an anti-cancer drug. This study is aimed at increasing curcuminʹs water solubility due to a biodegradable, neutral and non-toxic micellar nano-carrier called dendrosome. This study intends to evaluate the role of dendrosomal-curcumin (DNC) in bladder cancer cell growth. Methods: We performed the MTT assay, flow cytometry and Annexin V-FLUOS (as an apoptosis detection kit) to evaluate cell death. The genetic mechanism of DNC-induced apoptosis was accomplished by a study of the relative expressions of OCT4A, OCT4B1, SOX-2 and Nanog using real-time PCR. Results: DNC-induced cell death complied with a time and dose-dependent paradigm in the 5637 cell line. Cell cycle analysis revealed that the number of cells increased in pre-G1 and gradually decreased in G1 and S phases. This showed the inhibitory property of dendrosomal-curcumin on DNA synthesis. Data from real-time PCR determined that expressions of OCT4A, OCT4B1, SOX-2 and Nanog could be related to 5637 cancer cell growth. Dendrosomal-curcumin significantly suppressed mRNA expression of the above mentioned genes (p < 0.01). Conclusion: The data showed that DNC induced apoptosis by suppression of pluripotency genes in 5637 bladder cancer cells, which confirmed the useful characteristic of nano-drug in bladder cancer therapy.