جدا سازي، شناسايي و بررسي خاصيت آنتاگونيستي باكتري هاي چشمه آبگرم واسيدي استان بوشهر

Isolation, identification and considering the antagonistic properties of bacteria from hot water acidic spring in Boushehr province

سابقه وهدف:هدف از اين تحقيق شناسايي و جدا سازي باكتري هاي ترموفيل از چشمه آب گرم دالاكي واقع در استان بوشهر به روش بيوشيميايي وملكولي وبررسي خواص آنزيمي، ضد باكتريايي وضد قارچي سويه هاي جدا شده مي باشد. موادوروش ها:نمونه برداري از سطح آب ،لجن وعمق 1متري در شرايط استريل انجام شد. نمونه ها به مدت يك هفته گرما گذاري وسپس باكتري هاي رشد كرده خالص سازي شدند. شناسايي به دو روش بيوشيمايي وملكولي انجام شد. خواص ضد باكتر يايي عليه باكتري هاي اشرشيا كلي واستافيلو كوكوس اوريوس به روش كدورت سنجي وخواص ضد قارچي براساس قدرت بازدارندگي عليه آسپرژيلوس نايجر مورد بررسي قرار گرفت . يافته ها: 12 سويه(A1-A12) جدا سازي و خالص سازي شدند. سويه هاي A1,A8,A9,A1120%نمك كلريد سديم را تحمل كردند.سويه هايA1 و A11 توانايي رشد در 12-3= pH و دماي 56-20 در جه سانتي گراد داشتند.نتايج اثر ضد باكتريايي عليه استافيلوكوكوس اوريوس نشان داد كه در سويه هاي A5,A6,A7,A10,A11,A9,A12 با افزايش غلظت عصاره سويه ها از5 % به 20% ،خاصيت ضدباكتريايي به صورت معني دار افزايش يافت.در حاليكه تنها سويهA12سبب مهاررشد اشرشيا كلي در غلظت 20% شد. موثر ترين سويه عليه قارچ آسپرژيلوس A2و A6 بود.با توجه به توان رشد سويه A11 در طيف وسيع دما،pH وهمچنين ارجحيت توانايي آنتاگونيستي، ترادف ناحيه 16SrDNA مذكور تكتيروتوالي يابي شد. بر اين اساس سويهA11با تشابه 98%باسيلوس سوبتي ليس زير گونه اسپيززني NRRL (كد رهگيري lcl|48269 )شناسايي شد. نتيجه گيري: باكتري هاي ترموفيل به دليل اثر ضد باكتريايي وضد قارچي درتحقيقات آينده گزينه مناسبي در زمينه درمان بيماريها ومبارزه ميكربي مي باشند.

The aim of this study was identification and isolation of thermophilic bacteria from Dalaky hot spring located in Boushehr province using biochemical and molecular methods and considering of enzymatic properties, anti-bacterial and anti-fungal of isolated strains. Methods: Sampling from surface water, sludge and depth of one meter was carried out in sterile conditions. Samples were incubated for a week, then grown bacteria were purified. Identification was done using biochemical and molecular methods. Antibacterial properties against Eshershia coli bacteria and Staphylococcus aureus by torbidometery method and antifungal properties against Aspergillus niger based on the power of inhibitory were studied. Results: 12 strains (A1-A12) were isolated and purified. A1, A8, A9, A11 strains, can tolerate 20% sodium chloride salt. A1 and A11 strains are capable of growing at pH 3-12 and at temperatures of 20-56 ° C. The results of antibacterial effect against S. aureus strains showed that with increasing concentration of strain extract from % 5 to 20% in A5, A6, A7, A10, A11, A9, A12 strains, the antibacterial properties increased significantly; while just A12 strain prevented the growth of E-coli in concentration of 20%.The most effective strains against Aspergillus were A2 and A6. As A11 strains can grow in a wide range of temperature, pH, as well as the superior ability of antagonistic 16SrDNA coding region was sequenced. According to this A11 strain with 98% similarity was identified as Bacillus subtilis subsp. spizizenii strain NRRL . Conclusion: Because of anti-fungal and anti-bacterial effect , thermophilic bacteria is an excellent option in the treatment of bacterial diseases, in future studies