ميزان زنده‌ماني نوتروفيل خون محيطي به دنبال تيمار با سلول‌هاي ‏بنيادي مزانشيمال رت

Evaluation of peripheral blood neutrophil survival following ‎treatment with Mesenchymal stem cells in rats

سابقه و هدف: سلول‌های بنيادی مزانشيمال (‏Mesenchymal stem cells‏ يا ‏MSCs‏) به دليل سهولت خالص‌سازی، تكثير و ‏خاصيت تنظيم سيستم ايمنی، منبع مناسبی برای سلول درمانی می‌باشند. اين مطالعه به منظور بررسی اثر ‏MSCs‏ بر زنده‌مانی نوتروفيل ‏انجام گرفت.‏ مواد و روش‌ها: سلول مزانشيمال از مغز استخوان فمور و تيبيا رت 8-6 هفته استحصال شد و در محيط كشت ‏DMEM‏ ‏‏(‏Dulbeccoʹs Modified Eagleʹs Medium‏) كشت داده شد. سلول مزانشيمال پس از بلوغ، با نوتروفيل جدا شده از خون محيطی ‏رت به مدت 1 ساعت و در دمای 37 درجه سانتی‌گراد انكوبه گرديد. زنده‌مانی نوتروفيل در انكوباسيون‌های 6 و 24 ساعته با ‏MSCs‏ به ‏روش فلوسيتومتری و با استفاده از نرم‌افزار ‏An/PI‏ (‏Annexin/Propidium iodide‏) اندازه‌گيری شد. داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار ‏SPSS‏ و آزمون‌های ‏ANOVA‏ و ‏Tukey‏ در سطح معنی‌داری 05/0 > ‏P‏ مورد تجزيه و تحليل قرار گرفتند.‏ يافته‌ها: در انكوباسيون 6 ساعته نوتروفيل با ‏MSCs، درصد سلول‌ سالم به طور معنی‌داری كاهش و ميزان آپوپتوز نسبت به گروه ‏شاهد افزايش يافت و افزايش نكروز سلولی نسبت به گروه شاهد معنی‌دار نبود. در انكوباسيون 24 ساعته نوتروفيل با ‏MSCs، درصد ‏سلول سالم به طور معنی‌داری افزايش و ميزان آپوپتوز نسبت به گروه شاهد كاهش داشت و كاهش نكروز سلولی در گروه‌های تيمار ‏نسبت به گروه شاهد معنی‌دار نبود (05/0 > ‏P‏).‏ استنتاج: علاوه بر اهميت بالينی ‏MSCs، برخی جنبه‌های مهم بيولوژيك شامل خودنوزايی، تكثير و اثرات تنظيمی ايمنی آن‌ها، ‏پتانسيل مهمی برای درمان می‌باشد.‏

Background and purpose: Because of theirmultipotency and ease of purification, amplification and ‎immunomodulatory properties Mesenchymal stem cells (MSC), are anideal stem cell source for cell therapies. ‎This study was done to investigat the effect of Rat MSCs on the survival neutrophils.‎ Materials and methods: MSCs was isolated from rat (6-8 weeks) femoral and tibial bone marrow and ‎cultured in DMEM. Then maturation MSCs were incubated with neutrophils isolated from peripheral blood of ‎rat at 37 ° C for 1 h. Neutrophil survival was measured at 6 and 24 h incubation with of MSCs by flow ‎cytometric analysis using An/PI. Data were analyzed by SPSSsoftware, followed by Tukeytest at a significance ‎level of (P<0.05).‎ Results: The 6-hour incubation of neutrophils with MSCs, significantly reduced the percentage of ‎normal cells and increased apoptosis compared to controls and increased cell necrosis was not significant in ‎the treated group than in control. The 24-hour incubation of neutrophils with MSCs, significantly increased the ‎percentage of healthy cells and apoptosis was reduced compared to the control group, and reduced cell ‎necrosis was not significant in the treated groups than in control (p<0.05).‎ Conclusion: In spite of the clinical importance of MSCs, some biological aspects of them including ‎their self-renewal, proliferation and immune modulatory effects are of great therapeutic potential for cell ‎therapy.‎