تمايز سلول‌هاي دندريتيك مشتق از مونوسيت بر روي لايه‌اي از سلول‌هاي اندوتليال به‌عنوان لايه تغذيه‌كننده

Differentiation of monocyte-derived dendritic cells on endothelial cells as feeding layer

زمينه و هدف: پاسخ های ايمنی ذاتی و اكتسابی وابسته به مهاجرت لكوسيت ها از عرض سلول های اندوتليال كه نقش مهمی در شروع پاسخ های ايمنی سلولی دارند و در مسير مهاجرت از (DCs) می باشد. سلول های دندريتيك بافت های محيطی به عقد ههای لنفاوی با سلول های اندوتليال عروق لنفاوی تماس پيدا م يكنند. در اين تحقيق اثرات سلول های اندوتليال چسبيده به سطح و غيرفعال بر روی خصوصيات فنوتيپی و عملكردی سلول های دندريتيك مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: بعد از جدا نمودن سلول های تك هسته ای از خون محيطی و كشت آن ها فاكتور محرك- گرانولوسيت و مونوسيت) به مدت پنج ) GM-CSF و FCS ( اينترلوكين- 4 ) IL- حاوی 4 RPMI در محيط ،(MCM) روز سلول های دندريتيك نابالغ ايجاد شد. اين سلول ها همراه با فاكتورهای بلوغ (مايع رويی مونوسيت كشت داده RPMI بر روی سلو لهای اندوتليال اضافه شد و به مدت 48 ساعت، در محيط كشت (Poly I-C و TNF-α شد. هفت روز پس از كشت بلوغ سلو لهای كشت داده شده توسط دستگاه فلوسايتومتری، بتا كانتر و كيت الايزا بررسی شد. يافت هها: يافته های حاصل از اين مطالعه نشان داد كه سلول های اندوتليال از طريق تماس سلول به سلول با سلول های دندريتيك ارتباط برقرار نموده و باعث مهار بلوغ در سلو لهای دندريتيك می گردد. اين اثر به علت می باشد. آن ها هم چنين با مهار نمودن محرك های CD و افزايش بيان 14 HLA-DR و CD83, CD86, CD كاهش بيان 80 موجب كاهش تكثير آن ها می شوند. نتيج هگيری: براساس يافته های حاصل از اين تحقيق می توان T لنفوسيت هاي نتيجه گرفت، سلول های اندوتليال كه در مسير مهاجرت سلول های دندريتيك قرار می گيرند، می توانند به عنوان تنظيم كننده های بالقوه عملكرد و تمايز سلول های دندريتيك باشند.

Background: The innate and adaptive immune responses are dependent on the migration of leukocytes across endothelial cells. Dendritic cells (DCs) play an important role in the initiation of cellular immune responses during their migration from tissues into the lymph nodes where they interact with endothelial cells of lymphatic vessels. We investigated the effects of surface-adherent and non-activated endothelial cells on phenotypic and functional characteristics of dendritic cells. Methods: Immature dendritic cells were generated from the isolation of peripheral blood mononuclear cells and their subsequent culture in DC-RPMI 1640 medium containing 10% FCS, interleukin-4 and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) for five days. On day five, a maturation factor (composed of monocyte-conditioned medium, tumor necrosis factor-α (TNF-α) and poly I:C) was added to the RPMI medium where immature DCs were co-cultured with endothelial cell monolayer for 24 h. The maturation of harvested DCs on day seven was evaluated via flow cytometry, a beta-counter and an ELISA kit. Results: This study showed that the endothelial cells interact with dendritic cells generated from peripheral blood monocytes via cell-to-cell interaction. This interaction inhibits the maturation of DCs via decrease in the expression of CD83, CD86, CD80, HLA-DR and up-regulation of CD14. The interaction also inhibits the stimulation of T-lymphocytes resulting in a decrease in their proliferation. Conclusion: According to the findings of this study, it could be concluded that the endothelial cells can act as a potent regulator for DCs differentiation and function at the encounter made between them during the migration of DCs from tissues to lymph nodes.