مقايسه دو روش ARMS-PCR و AS-PCR در ارزيابي جهش JAK2V617F در نئوپلاسم‌هاي ميلوپروليفراتيو كلاسيك غير CML

ARMS-PCR Versus AS-PCR to evaluate JAK2V617F mutation in patients with non-CML myeloproliferative neoplasms

ييك تيروزين كيناز غير رسپتوری است كه نقش مهمی در اختلالات ميلوئيدی ايفا می كند. اخی را JAK زمينه و هد ف: 2 شناسايی شده (MPNs) در تعداد زيادی از بيماران مبتلا به نئوپلاس مهای ميلوپروليفراتيو JAK2 V617F جهش اكتسابي واقع بر روی كروموزوم 9 JAK در نوكلئوتی د 1849 در اگزون 12 از ژن 2 T به G است. اين جهش ناشی از تغيير م ی گردد . در JAK است كه منجر به جايگزينی اسيدآمينه فنيل آلانين به جا ی وال ين در موقعی ت 617 از پ روتيين 2 بر (AS-PCR) و آلل اختصاصی DNA بر روی (ARMS-PCR) مطالعه حاضر دو روش سيستم تكثير متزلزل جه ش ها در ارزيابی اين جهش مقايسه شد ه اند. روش بررس ی: مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود . در اين مطالعه RNA روي با روش نمون هگيری تصادفی ساده، در 58 بيمار با تشخيص جديد يا در حال درمان مبتلا به JAK2 V617F جهش مورد ارزيابی قرار گرفتند . برای تاييد نتايج، سه نمونه از AS-PCR و ARMS-PCR بدخيمی های ميلوپروليفراتيو با روش نتايج مشابه ی در بيماران AS-PCR و ARMS-PCR قرار گرفت . يافت هها: با هر دو روش Sequencing بيماران مورد 61 %) به دست آمد . اما در بيماران ترومبوسيتمی اوليه با روش / 86 %) و بيماران ميلوفيبروز اوليه ( 5 / پلی سيتمی ورا ( 6 8) به دست آمد . وجود جهش توسط روش /15)% شيوع 53 AS-PCR 7) و با روش /15)%46/ شيوع 6 ARMS-PCR با هر دو روش، قابل مقايسه با نتايج JAK مورد تاييد قرارگرفت . نتيج هگيری: ميزان شيوع جهش 2 Sequencing گزارش شده قبلی می باشد و تفاوت در نتايج گزارش شده می تواند وابسته به تكنيك مورد استفاده باشد.

Background: JAK2 is a nonreceptor tyrosine kinase that plays a major role in myeloid disorders. This mutation is characterized by a G to T transverse at nucleotide 1849 in exon 12 of the JAK2 gene, located on the chromosome 9p, leading to a substitution of valine to phenylalanine at amino acid position 617 in the JAK2 protein. In this study we compared the amplification refractory mutation (ARMS) assay and allele- specific (AS- PCR) to evaluate JAK2V617F mutation patients with non-CML myeloproliferative neoplasms (MPNS). Methods: In this experimental study we evaluated JAK2 mutation in 58 patients with a known or suspected diagnosis of a myeloproliferative neoplasm by simple randomized sampling. The mutation was detected by ARMS-PCR and AS-PCR in patients. In order to verify the methods, amplified products from some patients were sequenced. Results: The JAK2 V617F mutation was detected in 86.6%(26/30) of patients with polycythemia vera and 61.5%(8/13) of patients with idiopathic myelofibrosis by ARMS-PCR and AS-PCR. 46.6%(7.15) of essential thrombocythemia patients were positive using ARMS- PCR method while 53%(8.15) of then were positive when AS- PCR were used. The mutation was confirmed by sequencing. Conclusions: The incidence of JAK2 mutation using above PCR methods is similar to previous studies. The different results may depend on the molecular technique used