بررسي نورون زايي در مراحل مختلف چرخه استروس در هيپوكامپ موش كوچك آزمايشگاهي

Hippocampal neurogenesis in mice at different phases of the estrous cycle

سابقه و هدف: تفاوت هاي جنسي در مورفولوژي و عملكرد هيپوكامپ در گونه هاي مختلف گزارش شده اند. نوسانات طبيعي هورمون-هاي جنسي در طي چرخه استروس، بر نورون زايي هيپوكامپ حيوان ماده بالغ اثر دارد. هدف از اين مطالعه، بررسي تغييرات نورون-زايي هيپوكامپ در مراحل مختلف چرخه استروس مي باشد. مواد و روش ها: در اين مطالعه مراحل مختلف چرخه استروس موش كوچك آزمايشگاهي ماده نژاد NMRI با سن 6-8 هفته به روش رنگ آميزي اسمير واژن تعيين گرديد. با رنگ آميزي اجسام نيسل، سلول هاي عصبي هيپوكامپ و به روش ايمنوسيتوشيمي براي نشان گر Ki-67، تكثير سلولي مورد بررسي قرار گرفت. هم چنين، آپوپتوز سلولي با روش آزمون TUNEL بررسي شد. قطر عروق ناحيه ي هيپوكامپ نيز در مراحل مختلف چرخه استروس مورد سنجش قرار گرفت. نتايج: در مقاطع ميكروسكوپي رنگ آميزي شده با كرزيل ويوله، تراكم سلولي در مرحله ي پرواستروس بيشتر از ساير مراحل بود. مقايسه مقاطع رنگ آميزي شده به روش ايمنوهيستوشيمي براي نشان گر Ki-67، نشان داد كه تكثير سلولي در مرحله ي پرواستروس بيشتر از ساير مراحل است. به علاوه، قطر عروق در مرحله ي پرواستروس به طور معني داري بيشتر از مراحل دي استروس و مت استروس بود. هم چنين، با كمك آزمون TUNEL كمترين ميزان مرگ سلولي در مرحله ي پرواستروس تشخيص داده شد. نتيجه گيري: مرحله پرواستروس چرخه استروس موش كوچك آزمايشگاهي با افزايش تكثير سلولي و قطر عروق و نيز كاهش مرگ سلولي در ناحيه شكنج دندانه اي هيپوكامپ همراه است.

Background: Sex differences in the morphology and function of the hippocampus have been reported in several species. Natural fluctuations of sex hormones during the estrous cycle affect the hippocampal neurogenesis of adult female. This study aimed to investigate the neurogenic changes in the hippocampus at different phases of estrous cycle. Materials and Methods: Different stages of the estrous cycle of the NMRI mice (6-8) mice were determined by staining of vaginal smears. Also, the qualitative assessment of cell proliferation in the dentate gyrus of hippocampus was performed by Nissl staining and Ki-67 immunostaining marker (Ki-67). The apoptosis was determined using the TUNEL assay. Diameter of the hippocampal vessels was measured at different stages of the estrous cycle. Results: In microscopic sections stained with Cresyl Violet observed cell density in proestrous stage of estrous cycle was greater than any other stages of the estrous cycle. Comparison of sections stained with immunohistochemistry for Ki-67 staining showed that cell proliferation at proestrous are more than any other stages. The statistical analysis showed that vessel diameter was significantly greater at the proestrous stage than diestrous and metestrous. Also, TUNEL assay showed that cell death in the proestrous stage had the least reactivity. Conclusion: Proestrous stage of the estrous cycle was associated with increased cell proliferation and vessel diameter as well as reduced cell death in the dentate gyrus of the mice hippocampus.