تعيين همراهي ويروس ابشتين بار با لنفوم منتشر سلول‌هاي بزرگ B به روش CISH در بيماران با تشخيص لنفوم

Determining the correlation of Epstein-Barr virus with diffuse large B-cell lymphoma by chromogenic in situ hybridization

زمينه و هدف: لنفوم منتشر سلول‌های بزرگ B شايع‌ترين نوع از لنفوم‌های غيرهوچكينی می‌باشد. نقش ويروس ابشتين بار در ايجاد اين لنفوم شناخته شده است. اين مطالعه قصد دارد تا ميزان همراهی ويروس ابشتين بار را با لنفوم منتشر سلول‌های بزرگ B به روش Chromogenic In Situ Hybridization (CISH) در بيماران بخش پاتولوژی بيمارستان‌های شريعتی و سينا در سال‌های ١٣٨6-١٣٨4 مورد بررسی قرار دهد. روش بررسی: اين مطالعه به صورت مورد- شاهدی (Case/ control) بر روی ١۰۰ نمونه پاتولوژی انجام گرفته كه ٥۰ مورد از نمونه‌های لنفوم منتشر سلول‌های بزرگ B (DLBCL) در گروه مورد و ٥۰ مورد نمونه‌های غدد لنفاوی واكنشی و لوزه، در گروه كنترل قرار گرفتند. سپس نمونه‌ها آماده و به روش CISH جهت كشف EBV Encoded RNA (EBER) مورد بررسی قرار گرفتند. داده‌های به‌دست آمده با استفاده از آناليز آماری مورد تجزيه و تحليل قرار گرفتند.يافته‌ها: هشت مورد از ٥۰ نمونه گروه مورد برای EBER مثبت بودند درحالی كه تنها دو مورد در گروه كنترل مثبت گرديد كه از نظر آماری معنی‌دار می‌باشد (046/0P=). بين رخداد گره‌ای و خارج گره‌ای و هم‌چنين جنسيت مرد و زن تفاوت آماری معنی‌داری يافت نشد (736/0P=، 746/0P=).نتيجه‌گيری: يافته‌ها نشان داد كه EBER CISH نسبت به روش ايمونوهيستوشيمی ((Immunohistochemistry, IHC روش موفق‌تری در شناسايی ويروس EBV می‌باشد. ما پيشنهاد می‌نماييم در مطالعات آينده تحليل‌های آماری مقايسه‌ای بين سه روش Polymerase Chain Reaction (PCR) و IHC و CISH انجام پذيرد.

Background: Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) is the most common type of lymphoma. There are various types of DLBCL including immunoblastic and centroblastic. Epstein-Barr virus (EBV) is a member of Herpes virus family found in all human populations inducing different lymphoproliferative disorders. The role of EBV in the development of DLBCL is known. Multiple laboratory methods are available for detecting EBV. This study was conducted to determine the correlation of EBV with DLBCL in samples referred to pathology ward in Shariati and Sina Hospitals by chromogenic in situ hybridization (CISH) method.Methods: In this case/control study, pathological specimens of 50 patients with DLBCL as well as 50 reactive lymph nodes and tonsils (control group) were collected from archives of Shariati and Sina Hospitals and were evaluated for EBV encoded RNA (EBER) expression based on CISH method. A peptide nucleic acid (PNA) EBV probe (Dakocytomatin) was used while all the processes were done in RNAase-free conditions using RNAase-free water, sterile gloves and samplers. Results: Out of fifty specimens in the case group, eight were positive for EBER in comparison with two in the control group (P=0.046). No statistically significant difference was observed between intranodal or extranodal samples (P=0.736) or between males and females (P=0.0746).Conclusion: Our study showed that EBV positivity for EBER in patient with DLBCL could be determined more effectively by CISH method than immunohistochemistry (IHC). Comparative analysis between CISH, PCR and IHC methods is recommended.