كلونينگ، بيان و بررسي فعاليت ايمونولوژيكي ScFv حاصل از آنتي‏بادي منوكلونال موشي ضد پلاسمينوژن انساني با توانايي افزايش فيبرينوليز

Cloning, expression and immunological activity analysis of a ScFv from mouse monoclonal antibody against human plasminogen capable of enhancing fibrinolysis

امروزه آنتي باديهاي منوكلونال از پرمصرف ترين داروهاي بيولوژيك هستند. اولين گام در اين راستا ساخت قطعات آنتي بادي (ScFv) است كه مزيت آن در داشتن اندازه كوچك، پاكسازي (كليرانس) سريع از خون و نفوذپذيري بهتر به بافتها است. آنتي بادي منوكلونال A1D12 كه سبب افزايش هضم لخته مي شود، كانديد خوبي به عنوان دارو در بيماران مبتلا به اختلالات عروقي است. بنابراين هدف اصلي در اين بررسي برداشتن اولين گامهاي لازم در راستاي انساني كردن اين آنتي بادي يعني تهيه ScFv است. در اين تحقيق، قطعه تك زنجيره اي از نواحي متغير (ScFv) اين آنتي بادي تهيه و در سيستم E.coli بيان شد. نتايج حاصل از SDS-PAGE و ELISA صحت توليد ScFv و قابليت اتصال آن به پلاسمينوژن را اثبات مي كنند.

Nowadays, monoclonal antibodies are the most applicable biological drugs. To that end, the construction of ScFv is the first step, having the advantage of small size, rapid clearance from blood, and better penetration to the tissues. A monoclonal antibody (A1D12) that enhances the activation of plasminogen 3-50-fold in the presence of plasminogen activators is a good candidate as a drug for coronary disorders. The main goal of this study is to construct the single chain fragment of variable (ScFv) for humanization. In this investigation ScFv of A1D12 has constructed and expressed in E.coli, which is capable of recognizing the corresponding antigen according to the results of SDS-PAGE and competitive ELISA respectively.