اثر سميت عصاره آنغوزه برسلولهاي ماهيچه اي رده C2C12

Toxicity Effect of Assa-Foetida L Extract on C2C12 Cells

سابقه و هدف: از گياه آنغوزه به طور سنتي در درمان بيماريهاي مختلفي از قبيل آسم و درد معده، انگل روده، برگشت معده، آنفلوانزا و نارحتي هاي عصبي استفاده ميشود. اگر چه بعضي مطالعات به اثرات گياه آنغوزه پرداخته اند ولي اثرات سلولي - مولكولي آن كمتر مطالعه شده است، لذا اين مطالعه به منظور تعيين ميران پلي فنول هاي موجود در اين گياه و اثر سميت آن بر سلول هاي ماهيچه اي رده C2 C12 بعنوان يك مدل سلولي مصرف كننده گلوكز انجام شده است. مواد و روشها: ابتدا عصاره آبي- الكلي آنغوزه تهيه شد. سپس ميزان محتواي پلي فنولي آن با استفاده از اسيد گاليك به عنوان استاندارد، از روش Folin–Ciocalteu’s تعيين شد. ميزان سميت اين گياه بر رده سلولهاي تمايز يافته C2C12، با تهيه غلظت هاي 2500-50 ميكروگرم بر ميكروليتر عصاره آنغوزه و اثر دادن روي سلول ها بمدت 3 ساعت با استفاده از روش تريپان بلو ارزيابي شد. يافته ها: استخراج آبي-الكلي عصاره آنغوزه نشان دهنده دارا بودن محتواي پلي فنولي مي باشد. نتايج جذب غلظت هاي عصاره گياه بصورت خطي با جذب غلظت هاي اسيدگاليك بعنوان استاندارد پلي فنول ها افزايش مي يابد (9989/0=R2 در مقايسه با 9986.=R2 )اثر غلظت هاي متفاوت عصاره آنغوزه بر سلولهاي كشت شده در محيط DMEM نشان داد كه عصاره آبي- الكلي آن تا غلظت 200 ميكروگرم بر ميكروليتر اثر سمي بر سلول ها نداشته و سلول ها پس از سه ساعت در محيط تيمار شده آنغوزه پايدار مي باشند و ميزان زنده ماندن اين سلول ها در اين مدت در مقايسه با گروه كنترل تفاوت معني داري مشاهده نشد. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان مي دهد كه عصاره آنغوزه تا غلظت هاي 200 ميكرو گرم در مدت زمان سه ساعت اثر سميت براين سلول ها بعنوان يك رده سلولي عضلاني ندارد.

BACKGROUND AND OBJECTIVE: Assa-Foetida L is traditionally used in treatment of different diseases including asthma, roundworm, stomach reflex, flu and nervous disease. Although some studies have done on Assa-Foetida properties, but little studies have been done on its cellular and molecular effects. The aim of this study was to evaluate the amount of polyphenols in Assa-Foetida L and its toxicity effect on C2C12 as a cell model of glucose consumer. METHODS: At first, hydroalcoholic extract of Assa-Foetida L was prepared. The polyphenols of Assa-Foetida was determined using gallic acid as a standard by Folin–Ciocalteu’s method. The toxicity of the herbal on C2C12 cells was evaluated using Tripan blue at concentration of 50-2500µg/µl for 3 hours. FINDINGS: Hydroalcoholic extract of Assa-Foetida L contain polyphenol contents. Absorbance of Assa-Foetida L increases linearly with gallic acid absorbance (R2=0.9989 vs R2=9986). Different concentrations of Assa-Foetida L extract showed that its hydro-alcoholic extract up to 200 µg/µl concentration had no toxicity effect on C2C12 and the cells were stable in treated culture of Assa Foetida after 3 hours. There was no significant difference in viability rate of cells between treated and control groups. CONCLUSION: The results of this study showed that Assa-Foetida L extract up to 200 µg/µl concentrations had no toxicity effect on these cells after 3 hours.