چند شكلي در اگزون 17 ژن DGAT1 و ارتباط آن با صفات توليد شير در بزهاي نژاد مهابادي با روش PCR-SSCP

Polymorphisms in Exon 17 of DGAT1 Gene and Its Association with Milk Production Traits in Mahabadi Goat Breed Using PCR-SSCP

دي آسيل گليسرول آسيل ترانسفراز، يك آنزيم ميكروزومي است كه نقش مهمي در متابوليسم گليسرو ليپيد دارد. اين ژن نقش كليدي در كنترل سنتز تري گليسريد در سلول هاي چربي دارد. اين آنزيم مرحله نهايي سنتز تري گلسيريدها، يعني تبديل دي آسيل گليسرول (DAG) به تري آسيل گليسرول (TAG)، را كاتاليز مي نمايد. هدف از اين پژوهش مطالعه چند شكلي ژن DGAT1 و ارتباط آن با صفات توليد شير در بز نژاد مهابادي بود. از تعداد 79 راس از بزهاي مهابادي موجود در مزرعه آموزشي و پژوهشي گروه علوم دامي دانشگاه تهران (كرج) خونگيري به عمل آمد. استخراج DNA با استفاده از روش بهينه يافته نمكي انجام شد. كميت و كيفيت DNA با روش اسپكتروفتومتري و ژل آگارز 1% بررسي و تكثير قطعه اختصاصي بخشي از اگزون 17 ژن DGAT1 به كمك واكنش هاي زنجيره اي پليمراز انجام شد. براي بررسي چند شكلي اين قطعه، از روش چند شكلي فضايي تك رشته اي DNA(SSCP) استفاده شد. پس از الكتروفورز نمونه ها روي ژل پلي اكريل آميد 12% و رنگ آميزي ژل ها با روش نيترات نقره در مجموع 4 الگوي باندي مختلف با فراواني هاي 45/0 (الگوي4)، 25/0 (الگوي 1)، 24/0 (الگوي 2)، 06/0 (الگوي 3) مشاهده شد. اثر اين جايگاه بر مقدار شير (01/0P < ) و درصد چربي شير (05/0P < ) معني دار بود. مقايسه ميانگين حداقل مربعات نشان داد كه الگوي سه داراي بيشترين مقدار شير (01/0P < ) و الگوي يك داراي بيشترين ميزان درصد چربي شير بود (05/0P < ). مطالعه چند شكلي ژنتيكي در اين جايگاه ژني و ارتباط آن با صفات توليد شير بيانگر اين است كه مي توان احتمالاً از اين ژن كانديد به عنوان يك ابزار مفيد در برنامه هاي اصلاحي و انتخاب استفاده كرد.

Diacylglycerol transferase is a microsome enzyme that plays an important role in glycerol lipid metabolism. The acyl CoA-diacylglycerol- acyltransferase 1 (DGAT1) is considered to be the key enzyme in controlling the synthesis of triglycerides in adipocytes. This enzyme catalyzes the final step of triglyceride synthesis (transform triacylglycerol (DAG) into triacylglycerol (TAG). The present study has been designed to determine polymorphism in exon 17 of DGAT1 gene and their association with milk production traits in Mahabadi goat breed using PCR-SSCP. Blood sample were collected from 79 Mahabadi from research station of Animal Science Department at University of Tehran. DNA was extracted according to optimized salting out method. DNA quality and quantitative was determined with spectrophotometer and 1% agarose gel. A Fragment from exon 17 of DGAT1 gene was amplified using the polymerase chain reaction and SSCP technique was used to analyze polymorphism in this segment of DNA. PCR products were run in 12% polyacrylamide gel electrophoresis and were stained with silver nitrate. In overall, four SSCP patterns were observed with frequency of 0.25(1), 0.24(2), 0.06(3) and 0.45(4), respectively. The findings showed that DGAT1 gene had significant effect on milk production (P < 0.01) and fat percent (P < 0.05). Comparison of LS means showed that pattern 3 had the most effect on milk production (P < 0/01) whereas pattern 1 was more effective on fat percentage (P < 0/05). Polymorphism of DGAT1 gene and its relationship with milk trait indicated that it probably can be useful in marker assisted selection and breeding programs.