شناسايي تريكوموناس در خلط بيماران ريوي مزمن و آسمي بستري شده در بيمارستان مسيح دانشوري با استفاده از روش PCR

Identification of Trichomonas in the Lung Sputum of Patients with Asthma and Chronic Pulmonary Disease Admitted to Masih Daneshvari Hospital by PCR Technique

هدف: انگل تريكوموناس معمولاً در دهان و گاهي اوقات در مجاري تنفسي و حتي ريه انسان يافت مي‏شود. گرچه بيماري‏زا بودن اين انگل در سيستم تنفسي تا به حال به اثبات نرسيده است ولي در افرادي كه توجهي به بهداشت دهان و دندان ندارند يا از بيماري‏هاي مزمن تنفسي رنج مي‏برند حضور اين انگل در مجاري تنفسي شايع‏تر است. از اين رو در اين مطالعه توصيفي وجود انگل تريكوموناس با استفاده از PCR لانه‏گزين در نمونه خلط بيماران ريوي مزمن شامل افراد مبتلا به سرطان ريه يا بدخيمي در ريه، بيماري مزمن انسداد ريه، برونشكتازي و آسمي بستري شده در بيمارستان مسيح دانشوري در سال 1391 بررسي شد. مواد و روش‏ها: بدين‏منظور تعداد 133 نمونه خلط صبحگاهي از بيماران براي انجام آزمايش مشاهده مستقيم ميكروسكوپي اخذ شد. به علاوه DNA از 60 نمونه با استفاده از كيت سيناژن استخراج شد. سپس از روش Nested-PCR براي تكثير ژن ITS1 انگل استفاده شد. در نهايت توالي بازي نمونه‏هاي مثبت تعيين شد. نتايج: طبق نتايج به‏دست آمده از مشاهده ميكروسكوپي اسمير‏هاي رنگ‏آميزي شده تنها 4 نمونه آلودگي به تريكوموناس مثبت تشخيص داده شد. در آزمايش Nested-PCR از 60 نمونه، تعداد 22 نمونه(66/36 درصد) به انگل تريكوموناس آلوده بودند كه 33/33 درصد از زنان و 46/38 درصد از مردان را شامل مي‏شد. نتيجه‏گيري: با توجه به ميزان آلودگي اين انگل در گروه تحت مطالعه، احتمالاً ابتلا به بيماري تنفسي مزمن و آسم، زمينه را براي ابتلا بيشتر به اين انگل فراهم مي‏سازد.

Objective: Trichomonas species usually reside in the mouth and occasionally in the respiratory tract. These species can be found in the lungs of humans. Although the pathogenicity of the parasite in the respiratory system has not been proven, it is more prevalent in people who lack good oral health or suffer from asthma or chronic pulmonary diseases. In the present descriptive study, we have identified Trichomonas by direct microscopic observation of stained smears and by PCR on the lung sputum of patients with asthma and chronic lung diseases that include lung cancer, bronchiectasis, COPD, and malignant pulmonary disease who were admitted to Masih Daneshvari Hospital, Tehran, Iran. Methods: For direct examination of 133 sputum samples, we stained the smears with giemsa. In addition a total of 60 samples were used for DNA extraction by an extraction kit (Cinnagen). Nested-PCR was used for amplifying the ITS1 target gene of the parasite. Finally the DNA sequence of the gene was determined. Results: According to the results, in direct examination of the sputum smears there were only 4 positive cases identified, whereas 22 (36.66%) of the samples were identified as Trichomonas by nested PCR. According to gender, 33.33% of the female samples and 38.46% of the male samples were found to be positive. Conclusion: Considering the high prevalence of this parasite in the study group, chronic pulmonary disease and asthmatic patients may be more susceptible to Trichomonas.