بررسي فراواني ژن ctpA در باكتري هاي ليستريا مونوسيتوژنز جدا شده از طيور به روش PCR

The frequency of ctpA gene in Listeria monocytogenes isolated from poultry using PCR

سابقه و هدف: ليستريا مونوسيتوژنز توانايي ايجاد عفونت در انسان و حدود 50 گونه از حيوانات را دارد. گوشت و فرآورده هاي گوشتي نقش بالقوه اي در انتقال ليستريا به انسان دارند و باعث ايجاد بيماري ليستريوز مي گردند. هدف از اين مطالعه تعيين ميزان آلودگي طيور به ليستريا مونوسيتوژنز و بررسي فراواني ژن ctpA مي باشد. مواد و روش ها: اين پژوهش به صورت مقطعي-توصيفي بر روي 410 نمونه جمع آوري شده از طيور در شهركرد شامل 110 نمونه مدفوع و 100 نمونه از هر يك از بافت هاي كبد، طحال و مغز انجام شد. جداسازي ليستريا مونوسيتوژنز با استفاده از محيط هاي كشت اختصاصي صورت پذيرفت. آزمايشات PCR با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي ژن هاي 16S rRNA و ctpA ليستريا مونوسيتوژنز انجام شد. همچنين تمامي 410 نمونه به صورت مستقيم نيز با روش PCR ارزيابي گرديدند. يافته ها: از مجموع نمونه هاي مورد پژوهش، با روش كشت 24/20 درصد از نظر ليستريا مثبت تشخيص داده شدند. حضور ليستريا با روش كشت در نمونه هاي مدفوع، كبد، طحال و مغز به ترتيب 30/36%، 19%، 19% و 12% تعيين گرديد. اما با استفاده از روش PCR از مجموع 410 نمونه، 12/25 درصد آلوده به ليستريا بودند. همچنين ژن ctpA در 95/34% از ليستريا ها مشاهده شد. نتيجه‌گيري: يافته هاي ما نشان مي دهد كه ليستريا مونوسيتوژنز در طيور منطقه مورد مطالعه از فراواني نسبتاً بالايي برخوردار است. با استفاده از روش PCR امكان شناسايي مستقيم آلودگي ليستريا مونوسيتوژنز در نمونه هاي تهيه شده از طيور وجود دارد. Background and Objectives: Listeria monocytogenes is able to cause infections in humans and around 50 species of animals. Meats and their derivatives show a potential role in the transmission of Listeria to humans and epidemy of listeriosis. The aim of this study was to determine the contamination of poultry meats whit L. monocytogenes and to find out the frequency of ctpA gene. Materials and Methods: This cross-sectional study was carried out on 410 samples collected from poultry, including 110 fecal samples and 100 samples from each of liver, spleen and brain samples. Isolation of L. monocytogenes was performed using specific medium. PCR was performed using L. monocytogenes 16S rRNA and ctpA gene specific primers. Also, all of the 410 samples were tested directly using PCR. Results: Totally, 20.24% of the samples were positive for Listeria in culture method. The presence of Listeria in fecal, liver, spleen and brain specimens were 36.30%, 19%, 19% and 12%, respectively. However, based on PCR, 25.12% out of 410 samples were infected to Listeria. Furthermore, ctpA gene was found in 34.95% of Listeria. Conclusion: The results indicate that the frequency of L. monocytogenes in the poultry samples of this region is relatively high. PCR techniques make it possible to determine the L. monocytogenes infection directly in fresh samples