شناسايي موتاسيون در اگزون هاي 13 و 23 و بخشي از اينترون 12 از ژن jhdm2a در انسان و ارتباط آن با ناباروري مردان

Mutation detection in Exon 13 and 23 and a certain part of intron 12 of jhdm2a gene in human and its association with maleʹs infertility

زمینه و هدف: هیستون دمتیلاز حاوی دمین (JHDM2A) JmjC یك تنظیم كننده كلیدی تغییرات اپی ژنتیكی است كه در بیضه بیان می شود، برای اسپرم زایی ضروری است و به طور اختصاصی لیزین 9 هیستون3 را در حالت مونو و دی متیله، دِمتیله می كند. JHDM2A به طور مستقیم یا غیر مستقیم روی مناطق مركزی پروموتر پروتئین های گذرای هسته ای و پروتامین ها ، كه محصول آنها برای فشرده سازی كروماتین اسپرم نیاز است، اثر می¬گذارد. روش بررسی: در این مطالعه 150 مرد نابارور كه در آزمایش اسپرموگرام ثابت شده آزوسپرم و اولیگوسپرم هستند، مورد مطالعه قرار گرفتند. بر اساس مطالعات بیوانفورماتیكی و با استفاده از نرم افزار Clustal میزان مشابهت ژن jhdm2a بین انسان و موش 91% تخمین زده شد. اگزون های 13 و 23 انتخاب شده و برای شناسایی موتاسیون تكثیر شدند. محصول PCR آنها با استفاده از تكنیك SSCP مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها : در اگزون 23 هیچ تغییری در الگوی باند ها مشاهده نشد اما در دو فرد بیمار در اگزون 13 الگوهای باندی متفاوتی در SSCP در مقایسه با افراد كنترل و سایر افراد نابارور دیده شد. نتایج تعیین توالی نشان داد كه در این دو فرد بیمار یك موتاسیون از نوع جانشینی →A33838C وجود دارد.نتیجه گیری: در نتیجه با شناسایی موتاسیون های موجود در این ژن، می توان از آن به عنوان یك ماركر برای شناسایی ناباروری مردان استفاده كرد.

Background: JmjC-domain-containing histone demethylase 2A (JHDM2A) is essential for spermatogenesis and is a key epigenetic regulator expressed in the testis. It specifically demethylates mono- and di-methylated histone H3 lysine 9. JHDM2A directly or indirectly bound to the core promoter regions of transition nuclear protein and protamine genes, the products of which are required for packaging and condensation of sperm chromatin.Methods: In this work, 150 infertile men were studied.these men have been proved to be either oligospermia or azoospermia.91% similarity was observed between jhdm2a gene in human and mouse as shown by bioinformatic analysis using clustal software.exon 13 nad 23 were selected and amplified for mutation screening. The PCR products were used in polyacrylamid gel electrophoresis for further SSCP analysis. Results: Screening of exon 23 did not reveal any variation in subjects screened. Different SSCP patterns were observed among two infertile men, in comparison with others (controls and infertile men). A single nucleotide substitution C33838→A in exon 13 that causes prolin→glutamin exchange revealed by sequencing analysis in these three infertile patients.Conclusion: So by further mutation screening on this gene, it may be considered as a new gene marker for menʹs infertility.