اثر دو پكتين سيب يا اسيد پكتيك (AP) و پكتين تغيير يافته مركبات (MCP) بر ترشح نيتريك اكسايد در دودمان سلولهاي توموري هيپوفيز موش GH3/B6

Effect of apple pectin or pectic acid and modified citrus pectin on NO release and inhibition of cell proliferation in rat pituitary tumor cells GH3/B6

پكتينها تركيبات پلي ساكاريدي ديواره سلولي گياهان مي باشند كه قادر به القاي آپوپتوز در سلولهاي توموري هستند. مطالعه حاضر اثر اين مواد را بر آزادسازي نيتريك اكسايد در سلولهاي لاكتوتروفGH3/B6 كه از سلولهاي غده اي هيپوفيپز موش مي باشند، مورد بررسي قرارمي دهد . تاثير نيتريك اكسايد بر سلولهاي توموري به نوع سلول و غلظت آن بستگي دارد، به طوري كه قادر به ايفاي هر دو نقش مهاري و تسهيلي در روند آپوپتوز مي باشد. در پژوهشهاي انجام شده نشان دادند كه آنزيم نيتريك اكسايد سنتتاز، در دودمان سلولي هيپوفيز موش، GH3/B6 بيان مي شود و باعث توليد نيتريك اكسايد از ال- آرژنين مي گردد. در اين مطالعه سلولهاي GH3/B6 پس از تيمار با غلظتهاي مختلف اسيد پكتيك يا پكتين سيب (AP) و پكتين تغيير يافته مركبات (MCP)، سنجش نيتريك اكسايد در آنها انجام شد و سپس درصد مهار تكثير سلولي با استفاده از تست MTT تعيين گرديد. در اين پژوهش، انكوباسيون سلولها با mg/ml1 اسيد پكتيك، پس از 4 ساعت، موجب افزايش40 درصدي ترشح نيتريك اكسايد نسبت به گروه شاهد مي گردد، در حالي كه غلظتهاي مختلف پكتين تغيير يافته مركبات MCP)) تاثيري بر ترشح نيتريك اكسايد ندارد. مساله قابل ملاحظه اين است كه، غلظتهاي mg/ml5/2 و 5 از اسيد پكتيك و mg/ml 3 و 5 از پكتين تغيير يافته مركبات در انكوباسيون 24 و 48 ساعت، مهار تكثير سلولها را موجب مي گردند. نتيجه كلي در اين مطالعه را مي توان چنين بيان كرد كه AP موجب آزاد سازي نيتريك اكسايد از سلولهاي GH3/B6 مي شود. در حالي كه پكتين مركبات (MCP) فاقد اين اثر مي باشد، اما هر دو پكتين بر تكثيرسلولي اثر مهاري دارند بنابراين AP از راه آزادسازي نيتريك اكسايد اين مهار را انجام مي دهد و MCP مسير عملكردي ديگري مستقل از آزادسازي نيتريك اكسايد را دارا مي باشد.

Nitric oxide (NO) can both induce and suppress apoptosis according to the physiological conditions. Recent investigations have indicated that pectin derivatives, which are polysaccharides in the cell wall of plants, are able to induce apoptosis in cancerous cells. In the present study the amount of NO release from rat pituitary tumor cell line GH3/B6 after treatment with deferent concentration of modified citrus pectin (MCP), pectic acid (PA), SNP (as positive control) and L-NAME (as negative control) is under investigation. The cells were cultured in Ham’s F12 medium which was completed with 10% FBS and treated with different concentration of MCP and AP. The cell proliferation inhibition rate was determined with MTT assay. The amount of NO release was assessed by an indirect method of using Griess reagent. Our results demonstrated that incubation of GH3/B6 cells with 1mg/ml PA for 4 hours increased the amount of NO release up to 40% more than control otherwise none of MCP concentrations affect the secretion of NO. In addition, MTT assay determined significant proliferation inhibition rate for the cells with 2.5, 5 mg/ml of PA and 3, 5 mg/ml of MCP after 24 and 48 hours incubation. So these results suggest that PA may inhibit cell proliferation via induction of NO release in GH3/B6 cells but MCP shows its inhibitory effect on cell proliferation by another pathway.