جداسازي و شناسايي بيوشيميايي لاكتوباسيل‌هاي با توان پروبيوتيكي از روده ماهي شيربت

Isolation and Biochemical Identification of Potentially Probiotic Bacteria from Barbus grypus intestine

باكتري‌هاي اسيد لاكتيك، متدوالترين نوع باكتري‌هايي هستند كه به عنوان پروبيوتيك در آبزي‌پروري استفاده مي‌شوند. هدف اين تحقيق جداسازي و شناسايي باكتري‌هاي اسيد لاكتيك با توان پروبيوتيكي از روده ماهي شيربت بود. به اين منظور 50 قطعه ماهي شيربت (با ميانگين وزن 97/265±82/800) از منابع آبي استان خوزستان صيد و به آزمايشگاه منتقل و فلور باكتريايي روده ي آن ها بررسي گرديد. باكتري‌هاي اسيد لاكتيك روده‌ي نمونه‌ها توسط روش‌هاي فنوتيپي (رنگ آميزي گرم، تست‌هاي بيوشيميايي و فيزيولوژيكي) جداسازي و تخليص گرديد. سپس اين باكتري ها بر اساس شاخص‌هاي اوليه پروبيوتيكي شامل: مقاومت به اسيد، نمك‌هاي صفراوي و خاصيت آنتاگونيستي و عدم بيماري‌زايي براي ماهي امتيازدهي و ارزيابي گرديدند. از 50 ماهي بومي شيربت بررسي شده تعداد 30 جدايه مشكوك به باكتري‌هاي اسيد لاكتيك كه ميله‌اي يا كوكسي شكل (20 باكتري ميله‌اي و 10 باكتري كوكسي) بودند، جداسازي گرديد. از 30 جدايه‌ي مذكور، تعداد 20 جدايه بر اساس نتايج بيوشيميايي در جنس لاكتوباسيل قرار نگرفته و تعيين هويت نشدند و در مجموع 10 جدايه (10، 12، 15، 17، 18، 21، 22، 24، 29 و 30) بر اساس ويژگي‌هاي بيوشيميايي تعيين هويت بيشتر تا حد گونه قرار گرفته و شاخص‌هاي اوليه پروبيوتيكي آن‌ها ارزيابي گرديد. بعد از انجام آزمايش هاي تعيين توان پروبيوتيكي، چهار جدايه داراي بيشترين پتانسيل پروبيوتيكي از ميان جدايه‌هاي لاكتوباسيلي بودند كه اين چهار جدايه به ترتيب شامل: L. acidophilus، L. delbruecki L.brevis و L. fermentium بودند.

Lactic acid bacteria (LAB) are the most common type of microbes used as probiotics. Isolation and identification of lactic acid bacteria (LAB) from Barbus grypus intestine, based on their probiotic effects, were aimed in this study. Fifty B.grypus (800.82±265.97) were captured from natural water resources of Khuzestan province and transferred to laboratory. The bacterial flora of fish intestine were assessed. The intestinal LABs isolated and identified according to biochemical and morphometrical tests. Isolated LABs were evaluated and ranked based on probiotical indication tests (acid resistance, bile salt resistance , bacterial antagonistic effects and lack of pathogencity in fish). A total of thirty bacillus or cocci shape bacteria, suspected LABs, were isolated. Ten isolates identified as Lactobacillus and more identified to species based on biochemical tests. The probiotical identities of these ten isolates compared and finally four respectively isolates including L. acidophilus، L. delbruecki L.brevis and L. fermentium, were selected as potentially probiotic LABs of B.grypus intestine.