بررسي اثرات ضد قارچي رازيانه ، بومادران ، مرزه، دارچين و آرتيميزيا برعليه ساپرولگنيا پارازيتيكا در شرايط آزمايشگاهي

Evaluation of in vitro antifungal activity of Foeniculum, Achillea, Satureja, Cinnamomum and Artemisia against Saprolegnia parasitica

چكيده زمينه و هدف: ساپرولگنيوز از مهم‌ترين بيماري‌هاي قارچي آبزيان است كه خسارات شديدي را در مراحل مختلف رشد آبزيان، به صنعت آبزي پروري وارد مي‌سازد و توسط قارچ آبزي ساپرولگنيا پارازيتيكا ايجاد مي‌شود. اين مطالعه با هدف بررسي اثرات ضد قارچي عصاره متانولي گياهان رازيانه، بومادران، مرزه و دارچين و اسانس گياه آرتيميزيا برعليه قارچ ساپرولگنيا پارازيتيكا در مقايسه با فرمالين انجام شد. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه توصيفي، ساپرولگنيا پارازيتيكا از آب خروجي سالن پرورش ماهي قزل آلاي رنگين كمان جداسازي و خالص شد. پس از شناسايي فنوتيپيكي، ابتدا DNA ژنومي استخراج و ناحيه ژني ITS rDNA توسط آغازگرهاي ITS1 و ITS4 تكثير و تعيين توالي گرديد. اثرات ضد قارچي گياهان دارويي ذكر شده با روش ميكرودايلوشن براث بررسي و با فرمالين مقايسه شد. يافته ها: نتايج حاصل از تعيين توالي، گونه پارازيتيكا از جنس ساپرولگنيا را تاييد نمود. در روش ميكرودايلوشن براث اسانس گياه آرتيميزيا باعث مهار رشد ساپرولگنيا پارازيتيكا شد(حداقل غلظت مهار كنندگي معادل 128 ميكروگرم بر ميلي ليتر). هرچند كه با غلظت تعيين شده توان مهاري از خود نشان نداد(حداقل غلظت مهاري مساوي يا بيش از 2048 ميكرگرم بر ميلي ليتر). عصاره متانولي بقيه گياهان در غلظت تعيين شده هيچ گونه اثر مستقيمي بر اين قارچ نشان ندادند. نتيجه گيري: با توجه به نتايج، در مطالعه حاضر مي‌توان اسانس گياه آرتيميزيا را جز گياهان داراي اثرات ضد قارچي قوي طبقه‌بندي نمود كه نسبت به فرمالين اثر قوي‌تري را نشان داد. لذا با تحقيقات بيشتر بر تركيبات اسانس گياهان و با خالص سازي و كشف مكانيسم اثر آن و بهينه سازي روش‌هاي استخراج مواد موثره مي‌توان به نتايج مشابهي مانند داروهاي شيميايي كه اثرات جانبي بسيار بدي را دارند رسيد. واژگان كليدي: فعاليت ضد قارچي، ITSrDNA، گياهان دارويي، ساپرولگنيا پارازيتيكا

Abstract Background: Saprolegniasis is an important aquatic fungal disease that causes severe damages at different growth stages of aquatic animals. Saprolegnia parasitica has been identified as an important pathogen in aquaculture. This study was investigated the activity of antifungal methanolic extracts of Foeniculum vulgare, Achillea millefolium, Satureja hortensis, Cinnamomum zeylanicum, as well as Artemisia annua essential oil against S. parasitica in comparison with formalin. Materials and Methods: In this descriptive study, Saprolegnia parasitica originated from rainbow trout’s farm effluent. Phenotypic identification was performed and amplification of ITS rDNA region was adjusted by using of two general primers like ITS1 and ITS4, subsequently sequencing by use of internal primer were performed. The antifungal effects of the plants were investigated based on broth microdilution method and compared by formalin. Results: The results of sequencing verified the obtained fungus is S. parasitica. In broth microdilution method, the essential herb Artemisia inhibited the growth of S. parasitica at a concentration of 128 ?g/ml (MIC = 128 ?g/ml). At the same concentration, however, it did not show any fungicidal activity (MFC ? 2048 ?g/ml). Methanolic extracts of the plants fennel, yarrow, Savory, and cinnamon displayed no direct effects on S. parasitica Conclusion: Based on the results obtained in the present study, Artemisia can be classified as a powerful antifungal essential plant. The essence of Artemisia performed more effectively compared to formalin for the growth inhibition of S. parasitica. Keywords: Antifungal activity, ITS rDNA, Medicinal plants, Saprolegnia parasitica