مطالعه برهم كنش هاي بين بافت بلاستماي گوش خرگوش نژاد نيوزلندي و ماتريكس سلول زدايي شده لثه انسان (به عنوان داربست) در شرايط in vitro

The study of the interactions between blastema tissues originated from the pinna of New Zealand rabbit and a cellular human gingiva (as a scaffold) in vitro

چكيده زمينه و هدف: يكي از روش‌هاي مهندسي بافت براي ايجاد ساختارهاي بافتي جايگزين، جدا كردن سلول‌ها از فرد بيمار، گسترش دادن جمعيت سلولي روي يك داربست و در نهايت پيوند زدن بافت حاصل به فرد بيمار مي‌باشد. يكي از منابع سلولي، بافت بلاستما است. در اين مطالعه سعي شد از بافت لثه انسان در تهيه داربست استفاده شود و اينتركشن‌هاي بين اين داربست سه بعدي با بافت بلاستما بررسي شود. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، ابتدا لثه انسان تهيه شد و سپس با روش Snap freezing و استفاده از دترژنت سديم دودسيل سولفات (SDS) Sodium Dodecyl Sulfateو Triton X-100 بافت حاصل سلول‌زدايي گرديد. بررسي‌هاي بافت‌شناسي با رنگ آميزي‌هاي مربوطه انجام شد. سپس داربست‌هاي تهيه شده درون حلقه‌هاي بلاستمايي 2 روزه خرگوش قرار داده شد و در محيط كشت به مدت 25 روز نگهداري شدند. نمونه‌برداري از بافت بلاستما و داربست همراه آن هر 5 روز يك بار صورت گرفت. يافته‌ها: نتايج، حذف سلول‌ها از داربست آماده شده را تاييد نمود. علاوه بر اين نتايج بافتي در روز پنجم و دهم، نفوذ سلول‌هاي بلاستمايي به داخل داربست را نشان داد. در روز پانزدهم علاوه بر نفوذ، تقسيم و تمايز احتمالي سلول‌هاي بلاستمايي مشاهده گرديد. هم‌چنين اپيدرم زايي نيز قابل مشاهده بود. در روز بيستم و بيست و پنجم، روند نفوذ، تقسيم و تمايز سلول‌ها هم‌چنان ادامه داشت. نتيجه‌گيري: نتايج نشان دادند كه امكان تهيه يك داربست طبيعي از لثه انسان به اين روش وجود دارد. اين داربست مي‌تواند داراي اثر القايي بر رفتارهاي سلولي از قبيل مهاجرت، چسبندگي، تقسيم و احتمالاً تمايز باشد. هر چند مطالعات بيشتري براي اثبات هويت سلول‌ها و ساير ويژگي‌هاي اين داربست و هم‌چنين امكان استفاده از آن در روش‌هاي مهندسي بافت لثه‌اي مورد نياز است. واژگان‌كليدي: بافت بلاستمايي، سلول‌زدايي، برهم كنش سلول ماتريكس، تمايز، داربست سه بعدي لثه‌اي

Abstract Background: Obtaining cells from the patient, expanding cell population on a scaffold, and, eventually, grafting the tissue to the patient is one of the tissue engineering techniques to create replacement tissue structures. Blastema tissue is one of the cellular sources in this regard. This study investigated the use of human gum tissue to prepare a scaffold and the interaction between the three-dimensional tissue scaffold and blastema tissue. Materials and Methods: In this experimental study, human gingiva was prepared and through snap freezing method and the use of sodium dodecyl sulfate (SDS) and Triton X-100, went through cell bleaching. Then the provided scaffoldings were placed in 2-day-old blastema rings and stored in culture media for 25 days. Sampling of the blastema and scaffolding tissues was done once every five days. Results: The results confirmed the removal of the cells from the prepared scaffolds. Also, histological studies in the fifth and tenth days indicated cell penetration into the blastema scaffolds. In the fifteenth day, in addition to penetration, blastema cells division and differentiation as well as epidermis genesis were observed. In the twentieth and twenty-fifth days, infiltration, cell division, and differentiation processes continued. Conclusion: The findings of this study indicated the possibility of creating a natural scaffold of human gingiva through this method. This scaffold can have an inductive effect on cell behaviors such as such as migration, adhesion, division, and probable differentiation. However, further studies for demonstrating the identity of the cells and other properties of such a scaffold as well as the possibility of using it in gingiva tissue engineering are recommended. Keywords: Blastema tissue, Cell bleaching, Cell matrix interactions, Differentiation, Gingiva three dimensional scaffolds