تعيين اثر تنش گرمايي و ملاتونين بر بلوغ آزمايشگاهي اووسيت هاي نابالغ ميش

Determination of the effect of heat stress and different concentrations of melatonin on in vitro maturation of immature ovine oocytes

چكيده زمينه و هدف: تنش گرمايي سبب كاهش عملكرد توليد مثلي در حيوانات مزرعه‎اي مي‎شود. هدف از اين مطالعه تعيين اثر تنش گرمايي و غلظت‎هاي مختلف ملاتونين بر بلوغ هسته‎اي اووسيت‎هاي نابالغ گوسفند مي باشد. مواد و روش‎ها: در اين مطالعه تجربي، جمع‎آوري تخمدان و استحصال اووسيت به روش استاندارد بود، كشت اووسيت‎ها به چهار روش كه در روش اول TCM199 به علاوه 10 درصد FBS، FSH5 پيكوگرم بر ميلي‎ليتر، LH 01/0 واحد بين المللي بر ميلي‎ليتر، 100 واحد بين المللي بر ميلي‎ليتر پني سيلين و 100واحد بين المللي بر ميلي‎ليتر استرپتومايسين استفاده شد. روش دوم مشابه روش اول به اضافه تنش گرمايي با دماي40 درجه سانتيگراد و روش هاي سوم و چهارم نيز مشابه روش دوم به اضافه 1 و 10 ميكرومولار ملاتونين انجام شد. يافته‎ها: تنش گرمايي، بلوغ هسته‎اي را به طور معني‎داري(025/0p < ) نسبت به گروه كنترل كاهش مي‎دهد (60/60 در مقابل 89/84). 1 و 10 ميكرومولار ملاتونين توانست هنگام تنش گرمايي ميزان اووسيت‎هايي كه به متافاز-2 مي‎رسند را افزايش دهد( به ترتيب 60/60 در مقابل 92/76 و 82/78)، اما با افزايش غلظت ملاتونين از 1 به 10 ميكرومولار، ميزان بلوغ اووسيت‎ها تغيير نيافت. نتيجه‎گيري: به طور كلي اين مطالعه نشان داد كه ملاتونين هنگام تنش گرمايي بلوغ آزمايشگاهي اووسيت‎هاي نابالغ گوسفند را بهبود مي‎بخشد. واژگان كليدي: تنش گرمايي، ملاتونين، بلوغ اووسيت

Abstract Background: Heat stress reduces reproductive performance in farm animals. The aim of this study was to determine the effect of heat stress and different concentrations of melatonin on nuclear maturation of ovine oocytes. Materials and Methods: In this experimental study, ovary collection and oocyte recovery were carried out by standard methods. Oocytes culture was in A: TCM199+10% FBS, 5µg/ml FSH, 0.01IU/ml LH, 100 IU/ml penicillin, and 100 IU/ml streptomycin, B: A+heat stress at 40 C0, and C and D:B+1 and 10 µM melatonin, respectively. Results: Heat stress significantly (P < 0.05) decreased nuclear maturation in the treatment group in comparison with the control group (60.60 vs. 84.89). Also, 1 and 10 µM melatonin could improve oocytes to reach metaphase-II stage (60.60 vs. 76.92, 78.82, respectively). However, increasing the melatonin dose from 1 to 10 µM did not alter oocytes maturation. Conclusion: Overall, this study showed that melatonin improves ovine immature oocytes maturation during heat stress. Keywords: Heat stress, melatonin, oocytes maturation