رديابي ژنهاي مشاركت كننده در توليد آفلاتوكسين در تخم مرغ‌هاي مشكوك به آلودگي جهت غربالگري اوليه آنها

Detecting the participating genes in aflatoxin production in suspected eggs

چكيده زمينه و هدف: آلودگي مواد غذايي با قارچ‌ها و توليد مايكوتوكسين‌هايي نظير آفلاتوكسين منجر به ورود اين سموم به بدن انسان مي‌شود. آلودگي تدريحي با دوزهاي ضعيف اين مواد مي‌تواند به عنوان فاكتورهاي خطرناك عمده در ابتلا به سرطان كبد نقش داشته باشد. لذا اين تحقيق به منظور ارزيابي تشخيص آلودگي تخم مرغ‌هاي مصرفي در انسان جهت تشخيص سم آفلاتوكسين به كار گرفته شد. مواد و روش‌ها:دراين مطالعه مقطعي، 144 تخم مرغ مشكوك و 211 تخم مرغ سالم جمع‌آوري و سه نمونه قارچ آسپرژيلوس نيجر، پني سيليوم اكسپانسوم و فوزاريوم ورتيسيلوييدس به عنوان كنترل منفي و 14 نمونه آسپرژيلوس فلاووس به عنوان كنترل مثبت انتخاب و با تكنيك كروماتوگرافي نازك لايه و واكنش زنجيره‌اي پليمراز مورد آزمايش قرار گرفتند. نتايج حاصله با استفاده از نرم افزار SPSS تجزيه و تحليل گرديد. يافته‌ها: در تخم مرغ‌هاي سالم هيچ يك از رديف‌هاي ژن‌هاي مربوط به پرايمرهاي مورد استفاده در واكنش زنجيره‌اي پليمراز وجود نداشت. در تخم مرغ‌هاي مشكوك، در 4 نمونه nor-1 ، در 2 نمونه aflR، در 2 نمونه omt-A قابل رديابي بود. 3 نمونه از 14 سويه اخذ شده آسپرژيلوس فلاووس، با روش كروماتوگرافي نازك لايه و هر 4 پرايمر مثبت بود. يكي از سويه‌هاي اخذ شده فقط با هر 4 پرايمر در واكنش زنجيره‌اي پليمراز مثبت بود ولي در روش كروماتوگرافي نازك لايه منفي بود. نتيجه‌گيري: نتايج فوق نشان مي‌دهد كه علي رغم اين كه روش واكنش زنجيرهاي پليمراز يك روش حساس، سريع و اختصاصي مي‌باشد و وجود قارچ را قبل از ظهور كلني در نمونه مي‌تواند رديابي كند، لذا براي اثبات توكسين زايي نياز به آزمايشات مكمل ديگر دارد. كلمات كليدي: آفلاتوكسين، آسپرژيلوس، تخم مرغ، فوزاريوم، پني سيليوم

Abstract Background: Food contamination with fungi and the production of mycotoxins, such as aflatoxin, allow the toxins to enter human body. Continuous contamination with low doses of these agents can act as a major risk factor for hepatocellular carcinoma. Thus the present study was carried out to evaluate the detection of contamination in eggs with aflatoxin by PCR method. Materials and Methods: In a cross-sectional study, a total of 144 suspicious and 211 intake eggs were collected and three samples of fungi including aspergillus niger, penicillium expansum, and fusarium verticillioides as negative controls and 14 samples of aspergillus flavus as positive controls were selected and examined using TLC and PCR. The results were analyzed through SPSS software. Results: By PCR, neither aflR, omt-A, and ver-1, nor-1 was detected in intake eggs by PCR. Of the suspected eggs, four samples with nor-1, two samples with aflR, and two samples with omt-A could be detected. Three samples of the 14 strains of aspergillus flavus were shown to be positive through the use of TLC and the four primers. One strain of aspergillus flavus was positive with all of the four primers; however, it was negative in TLC. Conclusion: The findings of this study indicated that PCR is a sensitive, fast, and specialized technique, but it cannot detect the presence of the fungi before the appearance of colonization. Thus for indicating toxcification, other complementary tests are also required. Keywords: Aflatoxin, Aspergillas, Egg, Fusarium, Penicillium