بررسي بافتي، مولكولي و باكتريايي نمونه هاي بيماران مبتلا به بيماري هاي التهابي روده از بيمارستان بقيه الله (عج) تهران

• Histological Examination of the Molecular and Microbial Samples from Patients with Inflammatory Bowel Disease Hospital Baqiyatallah

مقدمه و هدف: يكي از علل عفونت هاي داخل بدن، آلودگي با باكتري E.coli واجد ژن pks است. اين ژن، باعث القا فسفوريلاسيون هيستون H2AX در انتروسيت هاي موش مي شود. در سلول هايي كه در معرض توكسين مي باشند، افزايش قابل توجهي در فراواني جهش در ژن هاي آن ها ديده مي شود. در اين تحقيق وجود منطقه ژني pks در باكتري E.coli جداشده از بيوپسي بيماران مبتلا به بيماري التهابي روده و افراد نرمال مراجعه كننده به كلينيك گوارش و غدد بيمارستان بقيه الله (عج) مورد بررسي قرار گرفته است. روش كار: مطالعات ميكروبيولوژي و مولكولي 20 نمونه بيوپسي افراد سالم و 25 نمونه بيوپسي از بافت روده بزرگ افراد مبتلا به بيماري التهابي روده مورد مطالعه قرار گرفت. پس ازشناسايي باكتري E.coli از بافت روده با روش هاي ميكروبي و بيوشيميايي ژنوم باكتري استخراج و به روش Multiplex PCR براي باكتري مورد نظر از لحاظ داشتن ژن هاي موجود در منطقه pks استفاده و محصولPCR به وسيله الكتروفورز بر روي ژل آگاروز 2% بررسي شد. يافته ها: نتايج مشخص نمود كه 28%از باكتري هاي E.coli جداشده از نمونه هاي بيماران، داراي منطقه ژني pks هستند.

Inroduction & Objective: Infection with E.coli Bacterium carrying PKS genes is considered one of the causes for infection inside the body, because the bacteria carrying PKS genes will induce Histone H2AX Phosphorylation in antrocites of mice. A considerable increase in frequency of mutations is seen in cells which are exposed to toxin. Studies indicate that infection can cause the potential for mutation. Therefore, colonization of species of E.coli bacteria carrying PKS genes can cause cancer development in large intestine. Material and Methods: In this research, we examined the existence of genetic island of PKS in E.coli bacteria taken from patients’ biopsies infected with inflammatory intestine disease and normal subjects whom have been to Digestion & Glands Clinic at Baghiatalah Hospital and the contrast between cancerous and healthy tissue was performed using a scanning electron microscope. Therefore, 20 biopsy samples of healthy people and 25 biopsy samples of intestine tissue from people infected with inflammatory intestine disease were examined in terms of microbiology and molecular structure. For this purpose, E.coli bacteria was detected by using the intestine tissue, microbiologic and biochemical approaches, then the their DNAs was extracted, and Multiplex PCR approach was used for the specific designed primers in terms of availability of genes in the PKS island, and the PCR products was examined using Electrophoresis on 2% Agarose Gel. Results: The results have indicated that 28% of the E.coli bacteria taken from patients’ biopsies have genetic area of PKS. Keywords: Inflammatory Bowel Disease, E.coli, Colibactin, pks Island