واكنش هاي ايمني سلولي لارو(Lepidoptera: Noctuidae) Spodoptera litura (Fabricus) عليه قارچ بيمارگر Beauveria bassiana

Cellular immune reactions of Spodoptera litura (Fabricus) (Lepidoptera: Noctuidae) against entomopathogenic fungi Beauveria bassiana

با توجه به جايگاه ارزشمند عوامل ميكروبي در كنترل آفات، بررسي برهم‌كنش سيستم دفاعي حشره با قارچ‌هاي بيمارگر مي‌تواند راهكاري نوين در اتخاذ برنامه‌هاي مديريت آفت محسوب شود. لذا در اين تحقيق، ايمني سلولي لاروهاي سن چهارم Spodoptera litura (Fabricus) در برابر دو جدايه‌ از قارچ Beauveria bassiana شامل Fashand و 566و ذرات (Latex Bead) با بررسي فعاليت سلول هاي خوني پروهموسيت، پلاسموتوسيت، گرانولوسيت، اونوسيتوييد و آنزيم فنل‌اكسيداز انجام شد. غلظت 106 اسپور در ميلي‌ليتر از جدايه هاي قارچي و106 ذره در ميلي‌ليتر لاتكس بيد به لاروها تزريق شدند و در فواصل زماني 1، 3، 6، 12 و 24 ساعت واكنش آن ها با هموسيت ها گزارش شد. تيمار شاهد شامل لاروهايي بودند كه با آب مقطر تزريق شدند. تعداد كل سلول ها، تعداد پلاسموتوسيت ها و گرانولوسيت ها در زمان هاي 3 و 6 ساعت پس از تزريق حداكثر بود كه تفاوت معني داري را با شاهد نشان داد. اما به تدريج پس از 6 ساعت تعداد كل سلول ها و تعداد افتراقي سلول هاي خوني كاسته شد. تعداد پروهموسيت ها در 3 ساعت ابتدايي پس از تزريق كاهش معني‌داري نشان داد. پلاسموتوسيت ها و گرانولوسيت ها در فرايند گره‌زايي شركت كرده و منجر به نابودي عامل بيگانه ‌شدند. گره‌زايي در فواصل زماني 3 و 6 ساعت پس از تزريق عوامل بيگانه در همولنف حشره مشاهده شد. فعاليت فنل اكسيداز در حضور سوبستراي L-DOPA اندازه‌گيري شد. اين پارامتر با تعداد سلول هاي خوني در زمان هاي مختلف ارتباط مستقيم نشان داد. بالاترين فعاليت اين آنزيم 3 و 6 ساعت پس از تزريق تيمارها بود. نتايج اين آزمايش ايمني شناسي حاكي از آن است كه سلول هاي خوني لارو S. litura در مقابله با عامل بيگانه اي چون اسپور قارچ و ذرات سنتزي لاتكس بيد فعاليت خوبي از خود نشان داده اند چنان كه همراه با افزايش تعداد سلول هاي موثر در ايمني، با تشكيل گره اطراف اسپور، توانستند آن ها را از بين ببرند.

Since microbial factors have important role in control of pests, determination of interactions between immune system and entomopathogenic fungi can be useful in IPM programs. Cellular immunity of 4th instars of Spodoptera litura (Fabricus) was investigated against two isolates of Beauveria bassiana (Fashand and 566) and latex-bead. Number of prohemocytes, granulocytes, oenocytoids and phenoloxidase activity was measured too. A concentration of 106 spore/mL of spores and 106 particle/mL latex-bead were injected to larvae and their interactions with hemocytes were recoreded at 1, 3, 6, 12 and 24 h time-intervals. For control, distilled water was injected to larvae. The number of hemocytes were maximum after 3 and 6 h of injection. Nodulation was occurred 3 and 6 h after injection. Phenoloxidase activity was determined in the presence of L-DOPA as a substrate after injection of fungal spores and latex beads. Phenoloxidase activity was highest in 3 and 6 h post injection. Result showed that hemocytes and phenoloxidase in S. litura had an important role in immune reaction. So, with increasing of hemocyte number, hemocytes aggregated around spores and lead to spore death.