عنوان مقاله :
راه اندازي و به كارگيري يك روش Multiplex Real-time RT-PCR حساس براي تشخيص همزمان ويروس نقص ايمني انساني نوع 1 و ويروس هپاتيت C در نمونه‌هاي پلاسما
عنوان فرعي :
Development and application of a sensitive multiplex real-time RT-PCR for simultaneously detection of HIV-1 and HCV in plasma samples
پديد آورندگان :
پريان، مهدي نويسنده دانشجوي دكتراي بيوتكنولوژي پزشكي، مركز تحقيقات بيوتكنولوژي، انستيتو پاستور ايران، تهران، ايران Paryan, mehdi , موندني‌زاده، مهديه نويسنده گروه ميكروب‌شناسي و ايمني‌شناسي، دانشگاه علوم پزشكي اراك، اراك، ايران Mondanizadeh, mahdyeh , محمدي يگانه، سميرا نويسنده دانشجوي دكتراي بيوتكنولوژي پزشكي، مركز تحقيقات بيوتكنولوژي، انستيتو پاستور ايران، تهران، ايران Mohammadi-Yeganeh , samira , خوانساري نژاد، بهزاد نويسنده دانشجوي دكتراي ويروس‌شناسي پزشكي، گروه ميكروب‌شناسي و ايمني‌شناسي، دانشگاه علوم پزشكي اراك، اراك، ايران Khansarinejad , behzad
اطلاعات موجودي :
دو ماهنامه سال 1390 شماره 58
كليدواژه :
multiplex , Real-Time PCR , ويروس نقص ايمني انساني نوع1 , HIV-1 , HCV , SYBR Green , ويروس هپاتيت , مالتيپلكس
چكيده فارسي :
چكيده
زمينه و هدف: ويروس نقص ايمني انساني نوع 1 و ويروس هپاتيت C از جمله مهمترين عوامل عفوني منتقل شونده از طريق خون محسوب مي‌شوند و از اين رو تشخيص صحيح، دقيق و حساس اين ويروس‌ها در افراد آلوده و خون‌هاي اهدايي از اهميت بسياري برخوردار است. به علت وجود برخي از محدوديت‌هاي روش‌هاي سرولوژيك در تشخيص اين عوامل عفوني، هدف اين مطالعه استفاده از روش‌هاي مولكولي سريع و حساس همچون Real-time PCR ميباشد.
مواد و روش‌ها: در اين مطالعه آزمايشگاهي، يك روش Real-time PCR Multiplex خانگي بر مبناي استفاده از رنگ SYBR GreenI راه اندازي شد كه در آن با استفاده از آناليز منحني ذوب مي‌توان عفونت منفرد و يا هم زمان ويروس نقص ايمني انساني نوع 1 و ويروس هپاتيت C را در نمونه‌هاي پلاسماي بيماران شناسايي نمود. آناليز آماري با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 16 انجام شد
يافته‌ها: نتايج به دست آمده از انجام واكنش‌هاي مختلف بر روي چندين نمونه باليني نشان داد كه حساسيت تجزيهاي (آناليتيكي) روش راه اندازي شده براي ويروس نقص سيستم ايمني نوع 1 معادل 200 كپي در هر ميلي ليتر 200 و براي ويروس هپاتيت C برابر 100 كپي در هر ميلي ليتر است. به علاوه نشان داده شد كه پرايمرهاي طراحي شده براي هر ويروس هيچ‌گونه واكنش متقاطعي با يكديگر و ساير عوامل مداخله گر ندارند.
نتيجه گيري: با توجه به سطح حساسيت و ويژگي مناسب، كاربرد آسان، هزينه نسبتاً كم و آناليز سريع نمونه‌ها، اين روش مي‌تواند يك روش سريع و مناسب براي تشخيص موثر و آسان ويروس نقص ايمني انساني نوع 1 و ويروس هپاتيت C در نمونه‌هاي پلاسما باشد.
واژگان كليدي: ويروس هپاتيت، و ويروس نقص ايمني انساني نوع1، مالتيپلكس، Real-time PCR، SYBR Green
چكيده لاتين :
Abstract
Background: HIV-1 and HCV are two of the most important blood-borne infectious agents. Hence, reliable, precise, and sensitive detection of these viruses in infected patients and donated blood units is highly important. Noticing the limitations of serological assays in detection of these infectious agents, this study was to use fast and sensitive molecular assays like real-time PCR.
Materials and Methods: In this trial, a home-brewed SYBR green-based multiplex real time PCR, on the basis of melting curve analysis, was developed for the single or simultaneous detection of HCV and HIV-1 infections in plasma samples. Data were analyzed using SPSS software version 16.
Results: The results obtained from different reactions on several clinical samples showed that the analytical sensitivities of the developed assay for HIV-1 and HCV were 200 and 100 copies/ml, respectively. It was also shown that the primers designed for each virus had no interaction with each other and other interfering agents.
Conclusion: Noticing the good level of sensitivity and specificity, easy handling, relatively low cost, and rapid analysis of samples, this method can be a useful and rapid approach for simple and effective detection of HCV and HIV-1 in plasma samples.
Keywords: HCV, HIV-1, Multiplex, Real-time PCR, SYBR Green
عنوان نشريه :
مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك
عنوان نشريه :
مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك
اطلاعات موجودي :
دوماهنامه با شماره پیاپی 58 سال 1390
كلمات كليدي :
#تست#آزمون###امتحان
