جداسازي باكتري استافيلوكوكوس سيمولانس توليد كننده ليزواستافين، از ورم پستان گاوي و شناسايي آن بر اساس تعيين توالي 16S rRNA

Isolation of Staphylococcus simulans, a lysostaphin-producing organism, from bovine mastitis and its identification based on 16S rRNA sequencing method

سابقه و هدف: استافيلوكوكوس سيمولانس يك كوكسي گرم مثبت و خوشه اي مي باشد كه از پوست، ادرار و نمونه هاي باليني انسان و حيوان به ويژه عفونت پستان گاوي جداسازي شده است. اين پژوهش با هدف جداسازي و شناسايي باكتري استافيلوكوكوس سيمولانس توليد كننده ليزواستافين، از ورم پستان گاوي و نيز معرفي آن به عنوان يك عامل درماني جديد در درمان عفونت هاي استافيلوكوكي انجام شده است. مواد و روش ها: اين پژوهش به صورت مقطعي-توصيفي بر روي نمونه هاي جمع آوري شده از پستان گاوهاي مبتلا به عفونت پستان در گاوداري مركز علمي و كاربردي جهاد كشاورزي واقع در كيلومتر6 جاده چشمه علي دامغان، استان سمنان انجام گرفت. نمونه ها پس از كشت بر روي محيط نوترينت آگار با رنگ آميزي گرم و آزمون هاي بيوشيميايي مورد بررسي قرار گرفتند. پس از استخراج DNA از نمونه هاي مشكوك به استافيلوكوكوس سيمولانس، به منظور شناسايي دقيق باكتري و بررسي وجود ژن ليزواستافين در سويه از روش PCR و تعيين توالي استفاده گرديد. يافته ها: از مجموع 61 كوكسي گرم مثبت خوشه اي جداشده از نمونه هاي ورم پستان گاوي، يك مورد باكتري استافيلوكوكوس سيمولانس شناسايي گرديد. تعيين توالي قطعه 16S rRNA باكتري نيز صحت جداسازي را تاييد نمود. نتيجه گيري: با توجه به اولين گزارش جداسازي باكتري استافيلوكوكوس سيمولانس از ورم پستان گاوي در ايران و نيز كارايي بالقوه ليزواستافين توليد شده توسط باكتري، مي توان از اين تركيب در درمان عفونت هاي باكتريايي مقاوم به آنتي بيوتيك استفاده نمود.

Background and Objectives: S. simulans is a gram-positive cocci that can be isolated from skin and urine, as well as some clinical samples in human and animals, such as bovine mastitis. The present study was aimed to isolate and identify S. simulans, a lysostaphin-producing organism, from bovine mastitis and to test therapeutic property of this species against the staphylococcal infections. Materials and Methods: This cross- sectional study was done on the collected samples from breast of the cows afflicted to mastitis in Damghan, Semnan Province. The samples were cultured on nutrient agar and were examined based on Gram staining and biochemical tests. Then, the genomic DNA of the samples suspected for S. simulans were extracted. The accurate identification of the bacteria and tracking of lysostaphin gene were evaluated by using PCR and sequencing. Results: One out of 61 gram-positive isolated cocci from bovine mastitis samples was detected as S. simulans. This result was verified using 16S rRNA sequencing. Conclusion: This study is the first report of isolation of S. simulans, a lysostsphin-producing organism, from bovine mastitis. This species is potentially useful for extraction of lysostsphin which is applied for treatment of the infections caused by antibiotic resistance bacteria.