رديابي مقايسه‌اي سالمونلا در نمونه‌هاي جوجه‌كباب جمع‌آوري شده از سطح تهران با سه روش مولكولي، كشت و الايزا

Comparison of bacterial culture, ELISA and PCR techniques for detection of salmonella in poultry meat samples collected from Tehran

سابقه و هدف: سالمونلا يكي از مهم ترين عوامل ايجاد ‌كننده مسموميت‌هاي غذايي در انسان ‌است. استفاده از روش هاي استاندارد كشت براي تشخيص و جداسازي سالمونلا و نيز ارزيابي خصوصيات باكتري از طريق آزمون‌هاي بيوشيميايي و سرولوژي به صرف 4 تا 7 روز زمان، دقت و مهارت كاربر و كيفيت محيط‌هاي كشت نيازمند است. اين مطالعه با هدف ارزيابي روش مولكولي PCR براي رديابي سريع سالمونلا در نمونه‌هاي گوشت جوجه ‌كباب و مقايسه كيفيت آن با دو روش الايزا و كشت استاندارد انجام شد. مواد و روش ها: اين پژوهش به صورت مقطعي – توصيفي بر روي60 نمونه جوجه كباب جمع آوري شده از فروشگاه‌هاي سطح شهر تهران انجام شد. فراواني سالمونلا در اين نمونه ها با استفاده از سه روش ميكروبيولوژي (كشت و آزمون هاي بيوشيميايي)، الايزا (كيت SAL-VIA96, TECRA) و PCR (تكثير ژن invA) مورد بررسي قرار گرفت. همچنين دقت، حساسيت و ويژگي سه روش با يكديگر مقايسه گرديد. يافته ها: از مجموع نمونه هاي مورد بررسي فراواني سالمونلا بر اساس سه روش كشت، الايزا و PCR به ترتيب 55%، 47% و 65% بود. نتايج نشان داد كه با استفاده از روش PCR و پرايمرهاي invA تنها با يك مرحله ‌غني‌سازي اوليه 20ساعته در محيط BPW مي توان در مدت 24 تا 30 ساعت با حساسيت و ويژگي 100% وجود سالمونلا را در نمونه غذايي مشخص نمود. نتيجه گيري: نتايج اين پژوهش نشان داد كه تكنيك PCR كفايت و حساسيت لازم به منظور پايش سريع سالمونلا را دارد. از اين رو استفاده از اين روش براي ارزيابي وجود سالمونلا در مواد غذايي پيشنهاد مي گردد.

Background and Objectives: Salmonella is one of the most important causative agents of food poisoning and gastroenteritis in humans. Using the standard culture methods for detection and isolation of Salmonella and also, the evaluation of bacterial characteristics by biochemical and serological tests, need to take 4 to 7 days, accuracy and skill of the lab staffs and quality of cultured media. Current study was carried out to assess PCR method for rapid detection of Salmonella in poultry meat samples and to compare its quality with two currently available standard culture and ELISA methods. Materials and Methods: This cross-sectional study was carried out on 60 samples of poultry meat collected from food stores of Tehran. The frequency of Salmonella was evaluated by using three microbiological methods culturing, ELISA (Kit SAL-VIA96; TECRA) and PCR (amplification of invA gene). Also accuracy, sensitivity and specificity of the methods were compared with each other. Results: In total of samples, the incidence of salmonella were 55%, 47% and 65%, by using culture, ELISA and PCR methods, respectively. Our findings showed that PCR based detection of salmonella using invA primers and only with a twenty hour pre-enrichment of samples in BPW is capable identifying Salmonella with high sensitivity and specificity (both 100%) in food samples in 24 to 30 hours. Conclusion: This study showed that PCR method has appropriate efficiency and sensitivity for rapid screening of Salmonella. Therefore, this technique is recommended to evaluate of Salmonella in food samples.