ارزيابي سيتوتوكسيك نوعي دود دارويي روي دو رده سلول سرطاني دهانه رحم و حنجره Hela) و (KB و يك رده نرمال (L929) به روش MTT

Cytotoxic evaluation of medicinal smoke "Anbar Nasara" against cancer cells (Hela & KB) and a normal cell line (L929), using MTT assay

مقدمه: دود طبي حاصله از منابع طبيعي سلامتي بخش در بسياري از كشورهاي دنيا استفاده مي گردد. يكي از اين دودهاي دارويي، دود ناشي از سوختن سرگين الاغ ماده با نام «عنبر نسارا» است. عنبر نسارا در طب سنتي و عاميانه ايران براي درمان بيماري هاي عفوني باكتريايي و ويروسي، تومورها و كيست هاي واژينال كاربرد دارد. بحث و نتيجه گيري: دود دارويي عنبر نسارا، حاوي تركيبات فرار متعددي است كه آثار سيتوتوكسيك مشاهده شده را مي توان به آنها نسبت داد. مطالعات بيشتر روي اين نمونه ها تركيبات موثره آن را مشخص خواهد نمود يافته ها: نتايج نشان مي دهد دود ناشي از سوختن عنبر نسارا روي رده هاي سلولي فوق الذكر در غلظت هاي معادل 2/0 ميلي گرم يا كمتر اثر كشنده دارد. مواد و روش ها: در اين مطالعه، سرگين الاغ ماده از شهرضا در استان اصفهان طي تابستان 1390 جمع آوري و توسط دستگاه طراحي شده، سوزانده شد. دود حاصله در لوله اي حاوي آب و n-هگزان كه توسط آب و يخ احاطه شده بود، جمع آوري گرديد. حلال در مجاورت هوا تبخير و از نمونه خشك شده براي انجام آزمون سميت سلولي به روش MTT، غلظت هاي 4/0، 3/0، 25/0، 2/0، 125/0، 1/0، 625% و 325% ميلي گرم در ميلي ليتر محيط كشت حاوي 1%، DMSO تهيه شد. اثر سميت سلولي اين غلظت ها پس از 48 ساعت انكوباسيون روي دو رده سلولي سرطاني (KB و Hela) و يك رده سلولي نرمال L929 از طريق تعيين درصد سلول هاي زنده بررسي گرديد.

Background: Medicinal smoke has been in natural health products by many nations all over the worlds. Dungʹs smoke called "Anbar Nasara" is one of the most used medicinal smokes in Iranian traditional medicine. Anber Nasara has been administered as inhalation in the treatment of viral or bacterial infections as well as for tumors and cysts in vaginal diseases in women. Its cytotoxic effects have been proposed in these studies. Materials and Methods: Dungʹs of female donkey have been collected from Shahreza, Isfahan province in summer 2011. The samples were burned in a specially designed apparatus and its smoke was collected in n-hexane solvent over ice-cold water. Solvent was evaporated in the air and dried residue was dissolved in DMSO and diluted in RPMI So that the final concentrations of 0.4, 0.3, 0.25, 0.2, 0.125, 0.1, 0.0625, 0.0312 mg/ml were obtained for MTT assay as a cytotoxic evaluation method against two cancer cells (KB and Hela) and a normal one (L929). After 48h incubation percent cell survival and IC50 values were obtained using ELISA plate reader at 540nm. Results: Results showed that dungʹs smoke were cytotoxic in tested concentrations against cancer cell lines in a dose dependent manner. The IC50 was calculated ? 0.2 mg/ml. Conclusion: Dungʹs smoke consists of too many constituents and its cytotoxic effect may belong to one or complexes of constituents. More researches are under way to clarify these aspects of the study.