جداسازي و شناسايي بيوشيميايي و مولكولي باكتري هاي پروبيوتيك از شير و ماست سنتي گاوميش شهرستان خوي

Isolation, biochemical and molecular identification of probiotic bacteria from traditional buffalomilk and yogurt of Khoi city

هدف از اين تحقيق، جداسازي و شناسايي باكتري هاي پروبيوتيك از فلور موجود در شير و ماست سنتي گاوميش شهرستان خوي مي باشد. براي رسيدن به اين هدف، باكتري هاي اسيد لاكتيك توسط روش هاي فنوتيپي (مورفولوژي سلولي، رنگ آميزي گرم، تست كاتالاز، تست هاي بيوشيميايي شامل رشد در دماها و غلظت هاي مختلف نمك و نيز تخمير انواع قندها) جداسازي شدند و پتانسيل پروبيوتيكي آن ها (مقاومت به اسيد معده و نمك هاي صفراوي) مورد ارزيابي قرارگرفت. سپس براي شناسايي دقيق تر با جفت آغازگرهاي اختصاصي، ژن 16SrRNAباكتري ها تكثير و بعد از خالص سازي محصول PCR، ژن مورد نظر براي توالي يابي ارسال شد. در پايان تحقيق، 13 سويه لاكتوباسيلوس و 6 سويه انتروكوكوس به عنوان فلور ميكروبي طبيعي داراي پتانسيل پروبيوتيكي در شهرستان خوي گزارش شدند كه كيفيت فراورده هاي لبني اين مناطق را تامين مي نمايند و اين سويه ها پتانسيل كاربرد درفراورده هايلبني توليد شده در صنعت را دارا مي باشند.

The aim of this study was to isolate and identify the probiotic bacteria from microbial flora of buffalo milk and its traditional yogurt in Khoi city. To achieve this goal, the lactic acid bacteria were isolated by phenotypic methods (cellular morphology, Gram staining, catalase test, biochemical tests including growth in different temperatures, various concentrations of salt and fermentation of different types of sugar) and their probiotic potential (resistant to stomach acid and bile salts) were evaluated. Then, to identify more accurately, the 16S rRNA gene of bacteria were replicated with pairs of specific primers and then the purified PCR product was sent for gene sequencing. At the end, 13 strains of Lactobacilli and 6 strains of Enterococci were reported as the natural microbial flora with probiotic potential in Khoi city. These bacteria provide the good quality of the dairy products in those areas and can be used in industrial manufacture of dairy products