بررسي القاي تمايز سلول‌هاي بنيادي به سلول‌هاي بتاي پانكراس به‌وسيله عصاره متانولي يونجه

Evaluation of differentiation induction of mesenchymal stem cells into pancreatic beta cells by methanolic extract of Medicago sativa L

مقدمه و هدف: جايگزيني سلول‌هاي بتا به‌وسيله پيوند جزاير پانكراس، نويدبخش درمان ديابت نوع 1 است. در مطالعات جانوري و انساني، مشخص شده‌است كه گياه يونجه (Medicago sativa.L ) از خانواده لگومينياسه، توانايي‌دارد قند خون را كاهش‌دهد؛ اغلب اين مطالعات بر تاثير عصاره گياه بر ميزان گلوكز ناشتا متمركز شده‌اند؛ تابه‌امروز، تحقيقي درخصوص ارزيابي توانايي اين گياه در تمايز سلول‌هاي بنيادي به سلول‌هاي بتاي پانكراس در شرايط آزمايشگاهي انجام‌نشده‌است. مطالعه حاضر به‌منظور بررسي آثار احتمالي تروفيك عصاره گياه يونجه(MSE) برتمايز سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي (MSCs) به سلول‌هاي انسولين‌ساز (IPCs) انجام‌شده‌است. مواد و روش‌ها: سلول‌هاي MSCsموش، جداسازي و به‌صورت تك‌لايه كشت‌داده‌شدند؛ سلول‌هاي يادشده پس از تلاقي، با استفاده از آزمايش‌هاي القاي بافت چربي و استخواني، شناسايي و تاييد‌شدند؛ به‌منظور القاي تمايز در اين سلول‌ها به سلول‌هاي انسولين‌ساز، غلظتي مشخص از MSE به محيط كشت اضافه شد. رنگ‌آميزي ديتيزون(DTZ) به‌منظور بررسي سلول‌هاي IPCs مشتق ازMSCs در شرايط آزمايشگاهي استفاده‌شد. سلول‌هاي DTZ مثبت شمارش‌ و با استفاده از نرم‌افزار آماري SPSS تجزيه‌وتحليل‌شدند. حضور پروتيين‌هاي اختصاصي سلول‌هاي بتاي پانكراس با استفاده از ايمنوفلورسنس تعيين‌شد. نتايج: تيمار با MSE تاثيري چشمگير بر تمايز سلول‌هاي MSC به سلول‌هاي IPCs داشت. در بررسي مورفولوژي سلول‌ها با استفاده از DTZ دستجات سلولي قرمز ارغواني مشابه جزاير لانگرهانس مشاهده‌شد. سلول‌هاي تمايز‌يافته نسبت‌به سه آنتي‌بادي C - پپتيد، انسولين – پروانسولين و رسپتور انسولين بتا پاسخ ايمني دادند. نتيجه‌گيري: نتايج نشان‌دادند كه MSE به‌طور موثري توانست باعث القاي تمايز MSCs به سلول‌هاي IPC شود. ازآنجاكه سلول‌هاي MSC به‌طور گسترده در دسترس بوده، به‌راحتي كشت‌مي‌شوند، ابزار آزمايشگاهي ارزشمندي را براي مطالعه تمايز سلول‌هاي بتاي پانكراس فراهم‌مي‌كنند.