مقايسه سلول‌هاي بنيادي مشتق از بافت چربي و سلول‌هاي استرومايي مغز استخوان بر اساس توانايي خودتكثيري در پاساژهاي مختلف

A Comparison Study between Adipose-Derived Stem Cells and Bone Marrow Stromal Cells Based on Self-Renewal Potential of Various Passages

مقدمه:. برای سال‌های طولانی مغز استخوان مهم‌ترين منبع تهيه سلول‌های بنيادی مزانشيمی برای مهندسی بافت بود، ولی در سال‌های اخير بافت چربی جايگاه ويژه‌ای را در اين خصوص پيدا كرده است چرا كه جدا كردن اين سلول‌ها از بافت چربی آسان‌تر از مغز استخوان بوده و عوارض كمتری برای بيمار دارد. هدف از اين مطالعه بررسی و مقايسه سلول‌های بنيادی استخراج شده از دو منبع بافت چربی و مغز استخوان از نظر زمان تقسيم و درصد حيات در پاساژهای مختلف در شرايط آزمايشگاهی می‌باشد. روش بررسی: در اين مطالعه سلول‌ها در شرايط استريل و شرايط كشت يكسان در پاساژهای مختلف (تا ده مرحله) از نظر سرعت تكثير و زمان تقسيم با روش MTT مورد ارزيابی قرار گرفتند. همچنين به منظور بررسی ميزان تكثير، بيان ژن Oct-4 با روش نيمه كمی و با استفاده از RT-PCR و نرم‌افزار Image j مورد ارزيابی قرار گرفت. نتايج: سلول‌های بنيادی بافت چربی در مقايسه با سلول‌های استرومايی مغز استخوان در پاساژهای بالا مقاوم‌تر بوده و دارای سرعت تكثير بالاتری بودند. در بررسی نيمه كمی RT-PCR مشخص شد هر دو نوع سلول قادر به ايجاد باند مشخص بر روی ژل الكتروفورز هستند، اما سلول‌های بنيادی بافت چربی در مقايسه با مغز استخوان قادرند بيان بيشتری از Oct-4 را نشان دهند. نتيجه‌گيری: با توجه به كاهش زمان تقسيم و بالا بودن درصد سلول‌های زنده در پاساژهای طولانی مدت در سلول‌های بنيادی استخراج شده از بافت چربی نسبت به سلول‌های مغز استخوان، سلول‌های بنيادی بافت چربی می‌توانند منبع مناسبی برای سلول درمانی در كلينيك محسوب شوند.

Introduction: For many years, bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) was the main source for tissue engineering, though within recent years adipose tissue-derived stem cells (ADSC) has obtained a special place in this regard, since it seems easier to isolate these cells with fewer complications to the patients. Therefore, the purpose of this study was to compare two main sources of stem cells, ADSCs and BMSCs, considering cell doubling time and the percentage of viable cells during various cell passages. Methods: In this study, with equal Sterile and culture conditions in various cell passages, the percentage of viable cells and cell doubling time were assessed using MTT assay. Moreover, semi quantitative Oct-4 gene expression, RT-PCR method and image j software (1 to 10 passages) were applied to assess proliferation rate. Results: Attained results of this study demonstrated that, at high passages ADSCs have a higher proliferation rate and viable cells compared to BMSCs. Furthermore, semi-quantitative RT-PCR revealed the both cells were able to express Oct-4 and create a distinct band on gel electrophoresis, though ADSCs showed stronger band in comparison with BMSCs. Conclusion: Due to the rapid growth and viability, stem cells deriving from adipose tissue can be considered as a good stem cell source for cell therapy in the clinic in comparison with BMSCs.