مطالعه سيتوژنتيك و بهينه سازي روش دورگ سازي ژنومي در محل در جنس پسته (Pistacia spp.)

Cytogenetic study and optimization of genome in situ hybridization (GISH) method in Pistacia spp.

پسته (Pistacia vera) يكي از مهمترين محصولات باغي شناخته شده ايران در دنيا مي‌باشد كه نام ايران را با داشتن بيشترين ارقام تجاري دنيا به عنوان مهمترين مبنع ژرم پلاسم اين گياه مطرح نموده است. با اين وجود تعداد مطالعات كروموزومي روي اين محصول محدود و گزارشات موجود حاكي از تناقضاتي در تعداد كروموزوم‌ها مي‌باشد. در اين تحقيق گونه‌هاي پسته موجود در ايران شامل ارقام اهلي و گونه‌هاي غير اهلي خنجوك و بنه با استفاده از روش‌هاي كلاسيك رنگ‌آميزي كروموزوم و روش دورگ سازي ژنومي در محل مورد مطالعه قرار گرفتند. دو روش استو-آهن هماتوكسيلين و فولجن براي رنگ‌آميزي كروموزوم‌ها به كار گرفته شد. بر اساس نتايج، رنگ‌آميزي با فولجن، روش مناسب‌تري براي رنگ‌آميزي كروموزوم‌هاي پسته در مقايسه با روش ديگر بود. تعداد كروموزم‌ها در ارقام اوحدي، اكبري، احمدآقايي، نيش كلاغي و خنجري دامغان 15 جفت (30=n2) در حاليكه ارقام ايتاليايي و قزويني، واريته وحشي سرخس و گونه‌هاي خنجوك و بنه داراي 14 جفت كروموزوم (28=n2) بودند. در آزمايش دورگ سازي ژنومي در محل، تابش فلورسنتي كه دال بر هيبريداسيون پروب‌هاي ژنومي خنجوك و بنه با نمونه‌هاي كروموزومي ارقام اهلي باشد، مشاهده نگرديد. عدم مشاهده هيبريداسيون قابل رديابي مي‌تواند ناشي از مشتق شدن اين كروموزوم‌ها از رده‌هاي مختلف باشد.

Pistachio (Pistacia vera) is one of the most important horticultural products in the world known by the name of Iran. Moreover, Iran has the richest germplasm of pistachio due to the origin of pistachio and the existence of large numbers of commercial pistachio cultivars. Nevertheless, few chromosomal studies in pistachio have been yet reported and they however showed contradicting results on the number of chromosomes. In the present study, different pistachio species including P. vera, and wild species, i.e., Pistacia khinjuk and P. atlantica subsp. mutica were studied by classical chromosome staining and GISH technique. In order to stain chromosomes, two methods of aceto-iron-haematoxylin and Feulgen were used. Results indicated that the best staining was achieved by Feulgen compared with another method. Chromosome numbers of ‘Ohadi’, ‘Akbary’, ‘Ahmad-Aghaei’, ‘Nish-Kelaghi’ and ‘Khanjary’ were 2n=30 while chromosome numbers of ‘Italiaei’, ‘Ghazvini’ and ‘Sarakhs’ wild variety were 2n=28. Chromosome numbers of both P. khinjuk and P. atlantica subsp. mutica were 2n=28. In GISH experiment, no signal of hybridization of P. khinjuk and P. atlantica subsp mutica genomic probes were detected on P. vera chromosomes. This lack of detectable hybridization sites may however indicate that these chromosomes are probably originated from different taxa.