اولين گزارش از آلودگي طبيعي بالنگ (Citrus medica L.) به ‘Candidatus Phytoplasma aurantifolia’ در ايران

First report of natural infection of Citron (Citrus medica L.) by ‘Candidatus Phytoplasma aurantifolia’ in Iran

ʹCandidatus Phytoplasma aurantifoliaʹ قبلا به عنوان عامل بيماري جاروك ليموترش (Citrus aurantifolia L.)، بكرايي(Citrus sp.) و گريپ فروت (Citrus paradisi Macfad) از ايران گزارش شده است. درحال حاضر تقريبا تمامي باغات ليموترش استان هاي هرمزگان، سيستان و بلوچستان و كرمان به اين بيماري مبتلا هستند. اين بيماري روي ساير ارقام مركبات در ايران گزارش نشده است. در سال 1389 علايم جاروك روي تعدادي درخت بالنگ (Citrus medica L.) در برخي از باغات مركبات جنوب استان كرمان، ايران مشاهده شد. به منظور رديابي و شناسايي فيتوپلاسماي عامل بيماري، استخراج اسيد نوكلييك از رگبرگ مياني برگ درختان بالنگ داراي علايم جاروك، درختان بالنگ سالم بدون علايم (شاهد منفي) و درختان ليموترش داراي علايم جاروك (شاهد مثبت) انجام گرفت. در آزمون واكنش زنجيره اي پليمراز آشيانه اي (nested PCR) با استفاده از جفت آغازگرهاي عمومي فيتوپلاسما P1/P7 و R16F2n/R16R2، قطعه با اندازه مورد انتظار در نمونه هاي بالنگ و ليموترش داراي علايم جاروك تكثير شد. در نمونه هاي بالنگ سالم اين باند تكثير نشد. توالي نوكليوتيدي باند حاصل از PCR در تمام نمونه ها يكسان و شامل 1250 جفت باز بود كه 8/99% تشابه با توالي نوكليوتيدي ‘Ca. Phytoplasma aurantifolia’ نشان دادند. اين اولين گزارش از آلودگي طبيعي بالنگ به فيتوپلاسما در ايران است.

‘Candidatus Phytoplasma aurantifolia’ has been reported as causal agent of witches’ broom disease in Mexican lime (Citrus aurantifolia L.), Bakraee (Citrus sp.) and Grapefruit (Citrus paradisi Macfad) trees in Iran. Almost all of the lime orchards in Hormozgan, Sistan & Baluchistan and Kerman provinces are infected by this pathogen now. The pathogen is not naturally associated with other citrus varieties in Iran. During 2010, a several number of Citron (Citrus medica L) trees in commercial citrus orchards in Southern Kerman, Iran with witches’ broom symptoms were found. In order to detection and identification of the associated phytoplasma, nucleic acid was extracted from leaf midribs of symptomatic citron plants showing witches’ broom symptoms. Healthy citron plants were used as negative control. Mexican lime trees infected with ‘Ca. Phytoplasma aurantifolia’ were used as positive control. Nested PCR analysis of symptomatic citron as well as mexican lime trees showing witches’ broom symptoms produced an amplicon of the expected size using phytoplasma universal p1/p7 primer pair in first step and 16F2n/16R2 in second step. The healthy citron trees did not. Sequences obtained from all the amplicons were identical and consisted of 1250 bp nucleotide which had a high sequence similarity (99.8%) with ‘Ca. Phytoplasma aurantifolia’. This is the first report of a natural phytoplasma infection on citron in Iran.