شناسايي كنه‌ها و گونه‌هاي تيلريا و بابزيا در بزها با دو روش بيولوژي ملكولي و گسترش خوني: مطالعه استاني در شهرستان مشهد ‌

Identification of Babesia and Theileria species in goats and ticks with smear observation and molecular examination in Mashhad,Khorasan Razavi province, Iran

زمينـه مطالعه: بابزيوز و تيلريوز از بيماريهاي مهم انگلي تك ياخته‌اي هستند كه توسط كنه‌هاي سخت منتقل شده و باعث بروز زيان‌هاي اقتصادي در صنعت دامپروري مي‌گردند. ‌هدف: اين مطالعه با هدف شناسايي مولكولي آلودگي بابزيا‌ ‌و تيلريا‌ ‌در بزها و كنه‌هاي ناقل در شهرستان مشهد انجام گرفت. روش كار: 100‌ نمونه خون بز و همچنين تعداد 249 كنه سخت از گله‌هاي با تاريخچه آلودگي به پيروپلاسموز، جمع آوري شدند. نمونه‌ها در شرايط سرد به آزمايشگاه منتقل گرديد . از نمونه‌هاي خون گسترش تهيه شده و با گيمسا رنگ آميزي گرديد و با ميكروسكوپ نوري مورد آزمايش قرار گرفتند. كنه‌ها با استفاده از كليدهاي تشخيص موجود شناسايي شدند. كنه‌ها برحسب جنس وگونه و جنسيت به مجموعه‌هاي 5 تايي تقسيم گرديد. نمونه‌هاي خون؛ غددبزاقي و تخمدان كنه‌ها . با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي دو تك ياخته تيلريا‌ ‌و بابزيا‌ ‌مورد آزمايش PCR قرار گرفتند. نتايج: در اين مطالعه، در بررسي ميكروسكوپي گسترش‌هاي خوني، هيچگونه نمونه مشكوك به اجرام پيروپلاسمايي مشاهده نشد. از مجموع246 ‌كنه به تـرتيـب ريپـي سفـالـوس تـورانيكـوس127 (6/51)%، درمـاسنتـور مارژيناتوس‌ ‌67(2/27‌)%، هيالوما مارژيناتوم44‌ ‌(9/17‌‌)%، ريپي سفالوس سنگويينوس 4(6/1‌)%، هيالوما آناتوليكوم2 (8/0‌)%، ‌ هيالوما آسياتيكوم 1‌ (4/0‌‌)%، همافيزاليس سولكاتا‌ 1‌ (4/0‌‌)%شناسايي شدند. كنه غالب در منطقه ريپي سفالوس تورانيكوس‌ ‌تشخيص داده شد. نتايج آزمايشات ملكولي نشان دهنده عدم آلودگي همه نمونه‌هاي خون بز به تيلريا‌ ‌و بابزيا بودند. تنها در غدد بزاقي كنه هيالوما مارژيناتوم‌ ‌آلودگي به تيلريا‌ ‌تشخيص داده شد. نتيجه گيري نهايي: بر اساس نتايج ميكروسكوپي و ملكولي هيچگونه آلودگي تيلريايي و بابزيايي در بزهاي شهرستان مشهد بدست نيامد. همچنين در اين مطالعه كنه رپي سفالوس تورانيكوس‌ ‌كنه غالب آلوده كننده در بزهاي اين شهرستان بود. نتايج ملكولي فقط آلودگي غدد بزاقي هيالوما مارژيناتوم‌ ‌را به تيلريا‌ ‌تاييد نمود.

BACKGROUND: Babesiosis and Thosis are parasitic tick-borne diseases that cause a lot of economic loss in livestock Industry. Objectives: The purpose of the present study was to detect Babesia and Theileria infection in goats and and vector ticks in goats in Mashhad. Methods: One hundred blood samples of goats and 246 ticks were collected from some suspected flocks with history of piroplasmosis. The samples were transported to laboratory under cold condition. Blood smears were prepared and stained by Geimsa method and examined with a light microscope at ×1000 magnitude. The collected ticks were separated into tick pools of five according to their species and sex. The blood, salivary gland and ovaries of tick samples were examined using specific primers of Babesia.spp and Theileria.spp by semi nested-PCR. Results: Piroplasm bodies were not observed in any blood samples of goat in Mashhad. In a total of 246 collected ticks, seven species were identified as follows: R. turanicus 127(51.6%), D. marginatus 67 (27.2%), Hy. marginatum 44 (17.9%), R. sangunincus 4(1.6%), Hy. anatolicum 2(0.8%), Hy. asiaticum 1(0.4%) and Heam. sulcata 1(0.4%). Dominant tick species of goats in Mashhad suburb were R. turanicus and D. marginatus. The results of PCR showed that none of the blood samples were infected with Babesia spp. and Theileria spp. Also, Theileriainfectoin was detected in a sample salivary glands ofHy. marginatum. ConclusionS: Based on microscopic and molecular results, no Theileria spp. and Babesiaspp. infection were detected in goats. R.turanicus was the dominat tick species and Theileria spp. infection was detected in one sample of Hy.marginatum.