معتبرسازي روش كروماتوگرافي مايع با كاركرد بالا در اندازه‌گيري هيستامين در ماست

Validation of histamine determination Method in yoghurt using High Performance Liquid Chromatography

آمين‌هاي بيوژن تركيبات نيتروژني آلي باوزن مولكولي پايين هستند كه در اثر دكربوكسيلاسيون اسيدهاي آمينه آزاد ايجاد مي‌شوند. فرآورده‌هاي شير از جمله غذاهايي هستند كه ميزان آمين‌هاي بيوژن در آنها بالاست. جهت اندازه‌گيري هيستامين و ساير آمين‌هاي بيوژن در مواد غذايي روش‌هاي مختلفي مورد استفاده قرار گرفته است كه از بين آنها روش‌هايHPLC به عنوان روش مرجع اندازه‌گيري هيستامين در مواد غذايي مطرح مي‌باشد. هدف اين مطالعه معتبرسازي روشHPLC فاز معكوس جهت اندازه‌گيري هيستامين در ماست بود. فاز متحرك متشكل از استونيتريل و آب به نسبت (v/v 18:88) با سرعت جريان ml/min5/0 به صورت ايزوكراتيك بوده و پيك‌ها با استفاده از دتكتور UV در طول موج nm254 رديابي گرديدند. پس از تزريق غلظت‌هاي مختلف از استاندارد هيستامين منحني كاليبراسيون خطي بوده و ضريب تعيين‌كننده(r2) به ميزان 998/0 بدست آمد. بازيافت مناسب در همه سطوح آلودگي مشاهده گرديد و ميانگين بازيافت84% برآورد گرديد. در آزمون تكرارپذيري نيز درصد انحراف معيار نسبي (RSD (%4/4% بدست آمد. حد تشخيص و حد سنجش نيز به ترتيب /mlµ 14/ 0 و /mlµ42/0 بودند. نتايج آزمون معتبرسازي نشان داد كه مي‌توان از اين روش به عنوان يك روش قابل اعتماد و سريع جهت اندازه‌گيري هيستامين در ماست استفاده نمود.