بررسي فراواني فنوتيپ و ژنوتيپ ژن هاي VanA و VanB در انتروكوك هاي مقاوم به وانكومايسين جدا شده از نمونه هاي باليني بيمارستان الزهرا (س) اصفهان در سال 1390

Evaluation of the frequency of phenotype and genotype of Van A and Van B genes in vancomycine resistant enterococcus isolated from clinical sample of Alzahra Hospitals in Isfahan

زمينه و هدف: انتروكوك ها جزء فلور طبيعی دستگاه گوارش انسان می باشند، ولی تحت شرايطی می توانند باعث عفونت شوند و نقش مهمی در پخش ژن های مقاومت و ايجاد سويه های مقاوم به آنتی بيوتيك دارند. با افزايش استفاده از آنتی بيوتيك ونكومايسين، انتروكوك های مقاوم به وانكومايسين (VRE)يكی از پاتوژن های شايع بيمارستانی در سراسر دنيا هستند. ﺍﻳﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ با هدف ﺑﺮﺭﺳﻰ شيوع و فراوانی ژن های ﻣﻘﺎﻭﻣﺖ ﺩﺭ ﺳﻄﺢ ﻓﻨﻮﺗﻴﭙﻰ‬ ﻭ ژﻧﻮﺗﻴﭙﻰ در انتروكوك های مقاوم به وانكومايسين انجام شده است.‬ ‫ﺭﻭﺵ بررسی: در اين مطالعه توصيفی مقطعی، پس از جداسازی و تشخيص 165 سويه انتروكوك از نمونه های بالينی بخش های مختلف بيمارستان الزهرا (س) اصفهان در سال 1390 ﻭ ﺍﻧﺠﺎﻡ ﺗﺴﺖ ﻫﺎﻯ ﺗﺄﻳﻴﺪﻯ، ﺍﻧﺘﺮﻭﻛﻮﻙﻫﺎ ﺍﺯ ﻧﻈﺮ ﻣﻘﺎﻭﻣﺖ ﺑﻪ ﻭاﻧﻜﻮﻣﺎﻳﺴﻴﻦ ﺑﺎ ﺭﻭﺵ ﺍﻧﺘﺸﺎﺭ ﺩﻳﺴﻚ ﻭ همچنين آزمون E-test مورد بررسی قرار گرفتند. نمونه های انتروكوك های مقاوم به وانكومايسين با استفاده از روش Real Time-PCR از لحاظ وجود ژن های مقاوم به وانكومايسين VanA و VanB مورد مطالعه قرار گرفت. ﻳافته ها: نتايج نشان داد از ميان 165 ايزوله انتروكوك جمع آوری شده از نمونه های بالينی 79(48%) انتروكوك با روش انتشار ديسك به ونكومايسين مقاوم بودند، اما با روش E-test فقط 40(25%) انتروكوك دارای مقاومت سطح بالا به ونكومايسين بودند. با روش Real time-PCR از 40 نمونه مورد نظر 37 مورد (5/92%) حاوی ژن Van A و 3 مورد (5/7%) حاوی ژن Van B بودند. نتيجه گيری :براساس نتايج به دست آمده، تعداد سويه های جدا شده دارای ژن VanA بيشتر از سويه های جدا شده دارای ژن VanB در بيمارستان الزهرا (س) اصفهان می باشد. روش ژنوتيپی Real time-PCR دارای اختصاصيت بالا نسبت به روش های فنوتيپی انتشار ديسك و E-TEST را می باشد.

Background and aims: Enterococcis are a part of the normal flora of the human gastrointestinal tract, and play an important role in the spread of resistance genes and produce antibiotic-resistant strains. With increasing the use of vancomycin antibiotics, Vancomycin-resistant enterococci (VRE) are one of the major nosocomial pathogens in worldwide. The aim of this study was to investigate the frequency of phenotype and genotype of van genes in vancomycine resistant Enterococci. Methods: In this cross-sectional descriptive study, after isolating and identifying 165 strains of enterococci from clinical specimens in different wards of Alzahra hospital, the enterococcus isolates were identified by biochemical confirmation tests. Resistance of each isolate to vancomycin determined by disk diffusion and E-Test method and was tested for the presence of the van A and van B genes by Real time PCR. Results: The results of the 165 isolates of enterococci collected from clinical specimens showed 79 (48%) enterococcus was resistant by disk diffusion method to vancomycin, but using E-test, only 40 (25%) enterococci was resistant in high level to vancomycin. Real-time-PCR assay of 40 samples showed 37 patients (92/5%) included Van A gene and 3 (7/5%) with Van B gene. Conclusion: Based on the results of the present study, the rate of isolation of Van A-containing strains was higher than that of Van B-containing of Alzahra Hospital in Isfahan. Real Time-PCR has a high specificity compared to other phenotypic methods E-Test and disk diffusion method.